CAS: 9017-74-8
EC: 3.4.21.9
来源:牛肠激酶,重组大肠杆菌表达
1.产品简介
Miragen重组牛肠激酶是一种高纯度的重组牛肠激酶轻链片段。该酶经HPLC纯化,纯度高,特异性高,并且不含其他蛋白酶。肠激酶是一个特定的蛋白酶,它可以切割前面含有四个天冬氨酸的赖氨酸羧基端位点:天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 赖氨酸。肠激酶可去除位于蛋白质N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合标签。
2.产品优势
1)特定的蛋白酶,切割前面含有四个天冬氨酸的赖氨酸羧基端位点:天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 赖氨酸 (DDDDK)。
2)不含其他蛋白酶,无非特异性切割。
3.酶切条件
按照酶活性定义,酶切条件举例:
25mM Tris-HCl 8.0体系中:
融合蛋白浓度 0.1-1mg/ml (蛋白总量50-100µg)
重组EK用量 0.1-0.2U
温度 25℃
过夜酶切,或全酶切需要16h左右。
4.常见影响肠激酶活性的因素
在>200mM 咪唑,或>200mMNaCl,或>5%甘油,酶切效果受影响。可参照以下建议方法进行酶切:
1)为获得理想酶切结果,请将样品透析到25mM Tris-HCl 8.0缓冲液中,再进行酶切。
2)若不便透析,可将样品稀释,咪唑含量在100mM以下,NaCl浓度在50mM以下,甘油浓度小于5%以下进行酶切,酶的用量与蛋白的比例不变(即1U酶切500µg蛋白)。
3)如果样品溶液中含有上述成分中的一种或多种,且不便去除,此时适当增加酶量或延长酶切时间,也可达到较好酶切效果。
5.产品特性
6.产品信息