维生素是维持生物体正常机能的必不可少的一大类有机物质,虽然机体对这类物质的需求量很小,但却十分重要。维生素是个庞大的家族,目前所知的维生素就有几十种,大致可分为脂溶性和水溶性两大类。维生素常被作为营养强化食品的添加因子,广泛存在于谷类、果蔬、肉禽和蛋类等加工食品中,因此,维生素的检测对食品、饲料和医药领域都有很重要的意义。
维生素检测背景:市场上,食品添加剂像药品一样被标注上“剂量”。一般的添加食品有婴儿配方食品、谷类产品和果汁,可以为日常饮食添加更多营养成分。食品中添加的维生素必须进行严格控制,维生素在添加进食品之前就应通过检测,如果储存后再使用,则应重新检测。European Directive 2002/46 EC制定了一系列关于食品添加剂标识及检测添加过维生素的食品中标注的维生素含量的法规。我国国家标准GB5413-2010对婴幼儿配方食品与乳品中维生素含量也有明确的规定,标准中涉及的方法有微生物法及高效液相色谱法。
维生素传统测定方法大多步骤繁琐,检测周期长,操作费时,其中一些方法受干扰因素影响大,灵敏度较低,而在实际工作中往往要求测定结果准确、测定周期短、经济合算,这就导致对维生素快速分析方法的需求越来越迫切。为此,上海西宝生物科技有限公司将继续秉承其研发宗旨,致力于追求简便、快速、准确的维生素分析检测方法。
维生素检测方法
国际及国内维生素检测方法主要为微生物法及HPLC法,上海西宝生物提供检测用标准品,检测结果更准确可靠。
1.传统经典方法——微生物法
微生物法根据维生素为细菌生长所必需的原理,以细菌繁殖程度或代谢产物定量该维生素含量,适用于检测多种衍生物的总和。国家标准GB5413中检测维生素B12、烟酸和烟酰胺、叶酸、泛酸、生物素及肌醇测定第一法(仲裁法) 均为等同采用AOAC的方法——微生物法。微生物方法检测叶酸是国际官方机构认可的方法。尽管微生物法灵敏度高,结果准确,但传统微生物法有许多局限性:整个实验周期长,批次检测结果重复性差,检测结果误差大。上海西宝生物致力研发新产品进行改进。
2.仪器方法——HPLC液相色谱法及LC-MS-MS液质联用法
HPLC高效液相色谱法是根据被分离的组分在流动相和固定相中溶解度不同而分离,分离过程是一个分配平衡过程。其样品前处理简单,待测物一般不需要衍生化;灵敏度高(检出限达ng水平),特异性强,常用的检测器有荧光检测器(FD)、紫外吸收检测器(UV)、电化学检测器(ECD)等;分离速度快(10~30分钟)、效果好,适合多组份及同分异构体的分离;可一次性分析多种水溶性维生素。逐渐成为检测维生素的常用分析方法。
LC-MS-MS液质联用法基于质谱分析,先将物质离子化,按离子的质荷比分离,然后测量各种离子谱峰的强度,从而实现分析目的。不纯的样品要用色谱和质谱联用仪,是通过色谱分离,质谱充当色谱的检测器。
德国拜发公司配合HPLC高效液相色谱方法和LC-MS-MS法,按照ISO质量体系研发和推出了针对维生素B12、叶酸及生物素检测的免疫亲和柱,用于样品中维生素的纯化,广泛适用于多种样品,且样品前处理及操作简单,相比于MBA方法,具有更高的精确性和特异性,更加省时高效。其开发的新型高效维生素B12亲和柱EASI-EXTRACT®Vitamin B12(LGE)已通过美国AOAC审核和比对验证。研究人员LGE免疫亲和柱对提取后的样品进行纯化,并通过HPLC液相色谱或LC-MS-MS测定,测定结果准确度高:标准偏差为2.1%,重现性为4.3%,检测限和定量检测限为0.10和0.30μg/kg。该法适用范围广,与传统的微生物方法相比,具有快速、方便、灵敏度和准确性高的特点。亲和柱法关键是通过除去样品中的其他非维生素B12物质的方法,从而起到浓缩样品中的维生素B12的目的,使得样品中维生素B12含量达到液相色谱法检测限,提高其检测灵敏度。
3.其他推广方法
除了微生物法及HPLC法和LC-MS-MS法外,还有灵敏度和特异性都很高的ELISA酶联免疫试剂盒及酶法检测试剂盒。酶法试剂盒可用于维生素C的检测,该方法为MEBAK Commision中检测果汁等食品中维生素C的标准方法;而德国拜发生产的ELISA酶联免疫试剂盒能快速、方便、准确地定量检测食品中的维生素B12、生物素及叶酸等成分,不需要配备昂贵的仪器设备,大大节省了检测时间和测试成本。
维生素 ( Vitamin)是人和动物为维持正常的生理功能而必需从食物中获得的一类微量有机物质,在人体生长、代谢、发育过程中发挥着重要的作用。提供各种HPLC级别维生素标准品。