中药材中黄曲霉毒素整体解决方案

黄曲霉毒素具有较强致癌性，它们是一类真菌（如寄生曲霉和黄曲霉等）的有毒代谢产物，主要存在于药材、谷物、坚果、棉籽以及动物饲料等中。毒素远高于氰化物、砷化物和有机农药的毒性，其中以B1毒性较大。当人摄入量大时，可发生急性中毒，出现急性肝炎、出血性坏死、肝细胞脂肪变性和胆管增生。当微量持续摄入，可造成慢性中毒，生长障碍，引起纤维性病变，致使纤维组织增生。近年来为了加强对中药材的质量控制，根据国家食品药品监督管理局的部署和安排，经国家药典委员会有关单位和专家对中药材中真菌毒素的研究，拟在2010版中国药典的基础上，进一步增加中药的安全性指标控制项目，逐步加强对中药材中真菌毒素的检测。2015版中国药典中无论是中药材的品种，还是真菌毒素的种类，其相关检测数量均会增加。针对真菌检测监控体系的日益完善及其检测需求的不断增加，西宝生物近期推出了中药材中黄曲霉毒素检测整体解决方案，供广大实验者参考。

1、适用范围适合于陈皮、胖大海、僵蚕、酸枣仁、桃仁等中药材品种。执行2010版中国药典附录IX、V黄曲霉毒素测定法进行检测。

2、提取步骤取供试品粉末约15.0g(过二号筛)，精密称定，加入氯化钠3.0g，置于均质瓶中，精密加入70%甲醇溶液75.0mL，高速搅拌2分钟（搅拌速度大于11,000转/分），离心5分钟(离心速度2500转/分)，定性滤纸过滤、然后精密量取上清液15.0mL，置50ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45µm)滤过，量取续滤液20.0mL，待净化。

混合对照品溶液的制备：精密量取黄曲霉毒素混合标准品（黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2标示浓度分别为1.0µg/ml、0.3µg/ml、1.0 µg/ml、0.3µg/ml）0.5ml，置10ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，作为储备液。

3、免疫亲和SPE柱净化步骤净化

1.回温解冻：提前半个小时将黄曲霉毒素免疫亲和柱从冰箱拿出常温解冻；

2.上样：准确移取20mL提取好的样品溶液注入免疫亲和柱，使溶液以1滴/S的速度通过免疫亲和柱，直至2mL-3mL空气通过柱体，弃去流出液；

3.淋洗：用20mL水淋洗免疫亲和柱，流速为1滴/s---2滴/s，淋洗两次。直至空气进入免疫亲和柱，直至2mL-3mL空气通过柱体，弃去全部的流出液，抽干小柱；

4.洗脱：准确加入1.0mL甲醇洗脱，流速约为1滴/s，收集全部的洗脱液于干净的离心管中，用甲醇-乙腈-水(40: 18: 42)定容至2mL，供液相色谱测定。