狂犬病疫苗的发展和现状

来源：Seebio.cn作者：西宝生物人气：-发表时间：2012-01-12 14:43:38【大中小】

1885年法国科学家巴斯德首次将狂犬病病毒在兔脑连续传代和干燥减毒而制成的疫苗,奇迹般的救治了一名被疯狼严重咬伤的9岁小孩,开辟了人用狂犬病疫苗的新纪元100多年以来,特别是近二三十年现代细胞培养技术和分子生物学的发展,狂犬病疫苗取得了重大进展。

1．国外发展现况

1．1　Semple氏脑组织灭活疫苗

1911年由在印度的英国人Semple首创,疫苗内为完全无感染性活病毒,该疫苗只用作暴露后注射。但这种疫苗免疫效果不十分满意,全程免疫后仍有1‰的死亡病例,疫苗的局部和全身反应也比较重,特别是接种后引起的神经性麻痹病例较多,发生率一般为0. 5‰~2. 0‰,其原因与成熟动物脑组织中所含的髓磷酯有关。但限于经济和技术条件,直至2005年前仍有不少国家使用这种疫苗,其中印度是主要的制造、应用和出口这种疫苗的国家。

1．2　新生动物脑组织疫苗

考虑到动物脑组织中髓磷酯的含量随动物成熟而增加,为了减少神经性麻痹的反应, 1955年智利学者创用了以3~5日龄新生小白鼠脑组织制备的乳小白鼠脑疫苗,主要在拉丁美洲国家应用。前苏联于20世纪60年代研制成功乳大白鼠脑疫苗一直应用至20世纪70年代末。但于1960年在委内瑞拉发现11例与乳鼠脑疫苗相关的神经并发症等表明乳鼠脑疫苗的反应性仍然较大。为减少脑脊髓炎物质,以后对这种疫苗作了改进,如生产用的乳鼠只用接种时不超过1日龄的乳鼠,脑悬液经17 000g沉淀去除脑组织。这种疫苗当前仍在拉丁美洲应用。

1．3　禽胚疫苗

1956年以后又研制成功用鸭胚制备的疫苗(DEV),多数用于感染前预防。据报告中和抗体水平不如脑组织疫苗。也出现过神经系统并发症,其发生率为4/10万。1981年起美国及其他国家不再生产和使用这种疫苗。1980年瑞士Berna厂用化学提取和区带离心纯化技术生产一种鸭胚纯化疫苗(PDEV)。人体接种后产生的中和抗体水平与二倍体细胞疫苗相当,接种后不良反应很轻。是WHO推荐的4种疫苗之一,但产量很低,应用量很少。

1. 4　细胞培养疫苗

20世纪60年代以后用细胞培养为基质制备疫苗有很大发展,细胞培养人用狂犬病疫苗主要有以下几种:

1. 4. 1　地鼠肾细胞培养疫苗(PHKCV)　

1958年Kissling最早开始研究原代地鼠肾细胞培养疫苗,以后Fenje等用SAD株适应PHKC制成PHKCV, 1968年由加拿大批准用于暴露前和加强免疫。1966年前苏联用第33代地鼠肾细胞培养Vnukovo32株制备PHKCV,在前苏联和东欧许多国家广泛应用

1. 4. 2　纯化鸡胚细胞疫苗(PCECV)　

1965年日本Kondo将FluryHEP株病毒适应在鸡胚细胞培养,制成灭活疫苗。疫苗经过浓缩纯化后较乳鼠脑疫苗有更高的抗原效价。该疫苗已由日本制成冻干疫苗,批准应用。但在其他国家用量很少。1984年联邦德国Behring厂用FluryLEP株适应鸡胚细胞研制成功一种纯化的鸡胚细胞疫苗(PCECV)。1985年曾在南斯拉夫观察47名被证实为疯动物咬伤者,包括2名被疯狼严重咬伤的64岁妇女和51岁男性以及1名被疯狗严重咬伤头部的3岁儿童,应用疫苗和HRIG后全部得到保护。效果与HDCV可比,而且由于生产工艺简单,生产过程短,价格较HDCV便宜,是WHO推荐的疫苗之一,美国也已批准进口。

1. 4. 3　人二倍体细胞疫苗(HDCV)　

HDCV为美国W istar研究所首创,用人二倍体细胞WI-38株适应和培养病毒,以后法国Merieux研究所用MRC-5人二倍体细胞生产疫苗。疫苗经不同单位用脑组织疫苗和鸭胚疫苗进行过人体接种观察比较,证实接种后的不良反应很轻。又经不同国家按5~6针暴露后免疫,表明HDCV有很好的保护效果,合并抗血清接种无明显抑制作用。在伊朗1976年曾对45名被证实为狂犬病的狼和狗严重咬伤者,包括一处穿透咬伤或多处头面部受伤者,注射1针抗血清(40 IU/kg)的同时再注射疫苗1mL,以后于3、7、14、30 d及90 d时各注射1针,开始治疗的时间一般在咬伤后3 d,有的迟至14 d,结果经2年随访这些人全部得到保护。目前公认HDCV可以作为一种新发展疫苗的标准对照疫苗。

1. 4. 4　Vero细胞疫苗(PVRV)　

Vero细胞为非洲绿猴(Cerco-pithecus aethiopsmonkey)肾细胞的传代细胞,是一种在一定代次内不致癌的异倍体细胞,经WHO批准可以用于人类疫苗的生产基质。早期由法国Merieux研究所用Vero细胞为基质研制成功一种纯化的Vero细胞狂犬病疫苗(PVRV)。用微载体悬浮培养Vero细胞生产狂犬病疫苗,其优点为短时间内可以繁殖大量细胞并可进行工业化的大罐培养。所用毒种为与生产HDCV毒种相同的PM 1503-3M株。人体观察不良反应轻效果好,抗体应答和暴露后免疫效果与HDCV可比。1983年曾在突尼斯对75名被可疑疯动物咬伤者用PVRV进行免疫治疗观察,其中Ⅱ类受伤者占50%以上, 2 d内开始接种者占78. 5%。分注射4针(0、3、7和14 d)、5针(0、3、7、14和30 d)和6针(0、3、7、14、