核酸清除剂 DNA Cleaner
核酸清除剂, 本品使用不需要分离管, 即可去除低分子DNA片断(≤50bp)
DNA Cleaner 本品不需要使用有机溶剂或离心管,35分钟内即可高效清除50bp 以下DNA 片断。另外,本品还可用于dsRNA 的纯化。适合用于PCR 后的引物、引物对、dNTP、DNA 聚合酶的清除和限制性内切酶处理后的酶消除。
同时,利用乙醇沉淀法将ABI 公司BigDye Cycle Sequencing kit 扩增序列的DNA 样品纯化时,使用本品能得到清晰的序列结果。
特点
· 不需要使用分离管柱,也可纯化PCR扩增产物
· 高效浓缩500 ~ 2,500ng 的DNA
· 快35分钟即可完成PCR后的核酸纯化
DNA Cleaner 使用用途
去除底物
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去除底物二聚体
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去除dNTP
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DNA 纯化
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测序用
标记反应后纯化 |
酶去除
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操作时间
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处理容量
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◎
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◎
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○
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○
100~10,000 bp |
○
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○
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短35分钟
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与初样品相同容量
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与柱色谱法相比
DNA Cleaner
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Q公司柱色谱法
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Step 1
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添加与DNA溶液等量的DNA Cleaner。
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向PCR样品中添加5倍容量的结合液。此时,若混合物的颜色不为黄色,请添加3M醋酸钠。
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Step 2
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在室温下静置10分钟。
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向离心管中添加Step 1.的样品。
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Step 3
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在室温下离心分离10分钟。
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在室温下离心分离1分钟。
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Step 4
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除去上清液。添加70%乙醇。
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除去滤液。添加洗涤液。
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Step 5
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在室温下离心分离1分钟。
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在室温下离心分离1分钟。
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Step 6
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上清除去。干燥5分钟。
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除去滤液。
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Step 7
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TE Buffer、灭菌水溶解
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在室温下离心分离10分钟。
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Step 8
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FINISH
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添加50μL析出液。静置1分钟。
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Step 9
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-
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直接向分离管膜中添加析出液。
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Step 10
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-
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在室温下离心分离10分钟。
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Step 11
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-
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FINISH
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所需时间
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约35分钟
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约10分钟
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离心分离次数
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2次
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4次
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DNA Cleaner 使用例
1)低分子DNA(50bp 以下)的除去
条带1.:DNA Step Ladder (25-500bp)
条带2.:DNA Step Ladder (25-500bp)(DNA Cleaner 处理)
条带3.:DNA Step Ladder (25-500bp)(T 公司Kit)
条带4.:DNA Step Ladder (25-500bp)(Q 公司Kit)
条带2.:DNA Step Ladder (25-500bp)(DNA Cleaner 处理)
条带3.:DNA Step Ladder (25-500bp)(T 公司Kit)
条带4.:DNA Step Ladder (25-500bp)(Q 公司Kit)
图1 利用DNA Cleaner 去除50bp 以下的DNA 片断
使用本品可去除50bp及25bp的DNA 片断,可回收75bp 以上的DNA片断。与Q 公司Kit一样,可高效去除50bp 以下的DNA片断。
使用本品可去除50bp及25bp的DNA 片断,可回收75bp 以上的DNA片断。与Q 公司Kit一样,可高效去除50bp 以下的DNA片断。
2)高分子DNA(200bp 以上)的回收
条带1.:DNA Ladder
条带2.:DNA Ladder (DNA Cleaner 处理)
条带3.:DNA Ladder (T 公司Kit)
条带4.:DNA Ladder (Q 公司Kit)
条带2.:DNA Ladder (DNA Cleaner 处理)
条带3.:DNA Ladder (T 公司Kit)
条带4.:DNA Ladder (Q 公司Kit)
图2 利用DNA Cleaner 纯化高分子量DNA 片断
使用本品可高效回收200bp 以上的DNA片断。
使用本品可高效回收200bp 以上的DNA片断。
3)少量DNA 的回收率比较
[使用DNA]3kb 质粒
[DNA 量检测法]检测OD260/OD280吸光度,估算已回收DNA的量。
[DNA 量检测法]检测OD260/OD280吸光度,估算已回收DNA的量。
(图3)利用DNA Cleaner 进行质粒DNA 添加回收实验
使用本品进行100 ~ 2,500ng 的DNA 回收实验,其结果比Q 公司Kit 更高效去除DNA,对500ng 以上的DNA 回収率达90% 以上。.
使用本品进行100 ~ 2,500ng 的DNA 回收实验,其结果比Q 公司Kit 更高效去除DNA,对500ng 以上的DNA 回収率达90% 以上。.
产品编号
|
品 名
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包装
|
045-30741
|
DNA Cleaner
|
5mL
|
044-30711
|
25bp DNA Step Ladder (25-500bp)
|
500μL(100色带)
|
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