His标签蛋白纯化介质(IDA)
1、概述
金属螯合层析,又称固定化金属离子亲和层析(Immobilized metal ion affinity chromatography,IMAC)。该法利用蛋白质表面的某些氨基酸(如组氨酸、色氨酸、半胱氨酸等)和金属离子(Cu2+、Zn2+、Ni2+等过渡金属离子)发生特殊的相互作用的原理来实现蛋白质的分离。琼脂糖亲和介质(Ni)是将金属离子Ni2+螯合在琼脂糖凝胶上形成的一种亲和层析介质,具有吸附容量大、选择型好、易于再生、成本低等优点,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质及多肽的分离纯化,尤其是组氨酸标记蛋白质的高效纯化。
2、琼脂糖亲和介质(Ni)的应用
纯化组氨酸标记的乳酸脱氢酶
层析柱:6.4 cm ×1.0 cmI.D.,CV=5 ml
样品:组氨酸标记的LDH发酵液(0.45μm滤膜过滤,上样10ml)
流速:1ml/min
平衡缓冲液(A):20mM PB +0.1MNaCl +50mM咪唑, pH 7.4
洗脱缓冲液(B):20mM PB +0.1MNaCl +0.5M咪唑, pH 7.4
1: 发酵液
2: 本介质的流穿峰P0
3: 本介质的洗脱峰P1
4: 进口介质的流穿峰P0
5: 进口介质的洗脱峰P1
西宝提供的琼脂糖亲和介质(Ni)从发酵液中纯化His-tag LDH(组氨酸标记的乳酸脱氢酶),并与进口介质相比较。上图为琼脂糖亲和层析介质(Ni)纯化LDH的色谱图和电泳分析图。结果显示中心生产的琼脂糖亲和层析介质(Ni)与进口同类产品的纯化效果相当。活性分析结果表明,采用本中心生产的琼脂糖亲和层析介质(Ni)纯化得到的LDH的活性回收率达到80%以上,可以实现对进口介质的替代。
3、产品与服务
西宝可提供IDA(亚氨基二乙酸)、NTA(次氨基三乙酸)和CM-ASP(羧甲基天冬氨酸)三种不同螯合配体的Ni金属螯合介质,并可根据客户需求提供螯合其它金属离子(Cu2+、Co2+、Zn2+、Fe3+等)的介质。此外,为了解决金属离子残留问题,本中心还开发了未螯合金属离子的空白胶,用于吸附去除产品中残留的金属离子。
4、规格
产品名称 |
镍亲和介质 |
配基密度 |
15 ~120mmol/mL |
pH稳定性 |
3 ~ 13 |
粒径范围(μm) |
45 ~ 165 |
最大流速(cm/h) |
400 |
应用 |
用于含组氨酸标签蛋白的纯化 |
规格 |
50mL |
250 mL |
|
1 L |
西宝提供的介质如下:
产品名称 |
|||||
配基密度(ml介质) |
15~120mmol |
20~30 mmol |
5 mg |
7-10 μmol |
6 mg |
载量(ml介质) |
20~30mg(LDH) |
10mg GST |
2mg抗凝血酶III |
20mgBSA |
35mgIgG(兔) |
pH稳定性 |
3-13 |
3-12 |
4-12 |
4-12 |
2-11 |
粒径范围(μm) |
45-165 |
45-165 |
45-165 |
45-165 |
45-165 |
最大流速(cm/h) |
500 |
450 |
500 |
500 |
450 |
应用 |
用于含组氨酸标签蛋白的纯化 |
用于含GST标签蛋白的纯化 |
用于抗凝血酶III、凝血因子及干扰素等蛋白的纯化 |
用于白蛋白、干扰素、脂蛋白、凝聚因子等蛋白的纯化 |
用于多种抗体的纯化 |
官网:www.cxbio.com | 微信服务号:iseebio | 微博:seebiobiotech |
商城:mall.seebio.cn | 微信订阅号:seebiotech | 泉养堂:www.canmedo.com |
相关资讯
- 2010武夷山旅游
- 重磅!哈佛医学院:新冠特效药Paxlovid“助力”新冠病毒的体内复制!
- 赖氨酸标记葡聚糖 Lysine-Dextran
- 破骨细胞在太空更活跃
- 西宝生物2020年清明节放假通知
- 人钙结合蛋白 Elisa Kit
- 西宝生物常用科研试剂
- 木薯淀粉
- Cell子刊:胰腺癌细胞中引发转移性疾病的分子开关
- 基因编辑器CRISPR的产生和发展
新进产品
同类文章排行
- 胆碱酯酶检测原料一览
- 猴痘病毒检测原料(涵盖诊断酶、抗原、抗体),西宝生物助力猴痘检测
- 西宝生物CHO细胞、HEK293细胞、 Vero细胞培养基产品
- 人和动物免疫球蛋白IgG全新上市
- 如何选择合适的表面活性剂?
- 尿液分析试纸检测原理及产品推荐
- 总胆红素/直接胆红素检测一站式解决方案
- 分子诊断用酶原料一站式服务尽在西宝生物
- 体外诊断中交联剂的用途与选择
- 优异的化妆品级水溶性β-1,3-葡聚糖