Protein A纯化介质

来源：seebio.cn作者：西宝生物人气：-发表时间：2012-07-18 11:14:00【大中小】

1、产品简介

Protein A能特异性地与抗体的Fc区结合，所以Protein A亲和介质可用于抗体（单抗和多抗）的分离纯化，经过一步亲和层析，即可从腹水、血清和培养液等样品中得到高纯度的抗体。Protein A QZT 4FF亲和介质以自制的琼脂糖凝胶为基质，以重组Protein A为配基，具有很高的物理化学稳定性，配基不易脱落，寿命长，使用方便，应用广泛。

2、产品特性

参数	指标
基质	4%交联琼脂糖凝胶
配基	r-Protein A
形状	球形
介质平均粒径	90 μm (45-165)
配基密度	6mg ProteinA/ml wet gel
动态载量	30-40mg rabbitIgG/ml wet gel
最高流速（25℃）	450 cm/h
推荐流速	<150 cm/h
最高耐压	0.3 MPa (3 bar)
pH稳定性	3~10（长时间）；2~11（短时间）
保存	4~8 ^oC（20%乙醇）

3、应用

Protein A QZT 4FF广泛用于各种抗体的分离纯化。层析操作通常包括装柱、平衡、进料、淋洗、洗脱、再生等步骤。

平衡：用5~10CV的平衡缓冲液（20 mM PB+0.15MNaCl，pH 7.0，添加适当浓度的NaCl抑制非特异性吸附）平衡层析柱，至流出液电导和pH不变（与平衡液一致）。

进料：样品缓冲液应尽可能与平衡液一致。固体样品可用平衡液溶解配制；低浓度样品溶液可用平衡液透析；高浓度样品溶液可用平衡液稀释。为了避免堵塞层析柱，样品应经离心或微滤（0.45μm）处理。进料量根据介质的载量和料液中目标蛋白的含量计算。

淋洗：上样完毕后继续用平衡缓冲液淋洗至基线。

洗脱：用洗脱缓冲液（20 mM乙酸钠，pH 3.0-4.0或0.1M甘氨酸，pH 3.0）洗脱，收集流出液。洗脱后，应立刻用碱性缓冲液（如1M Tris/HCl, pH 9.0）将收集到的抗体溶液中和到中性，避免抗体失活，维持抗体的生物活性。

再生、原位清洗：介质使用数次（5-10次，具体次数与原料的种类和来源及实验要求有关）后，需要对介质进行再生、在位清洗。

（1）用0.1M的乙酸或0.1M的乙酸/20%乙醇淋洗柱子3-5CV，然后用缓冲液洗到中性即可重复使用；

（2）也可用0.05M NaOH+1MNaCl或6M盐酸胍淋洗柱子3-5CV，并用3~10 CV的纯水冲洗，然后用缓冲液洗到中性即可重复使用。

其它注意事项：在装柱、使用和保存柱子的时候，要避免柱子流干，气泡进入。

4、规格

货号	13-0010
产品名称	ProteinA亲和介质
配基密度
pH稳定性	2 ~ 11
粒径范围(μm)	45 ~ 165
最大流速(cm/h)	400
应用	用于多种抗体的纯化
规格	50mL
	250 mL
	1 L

5、特色服务

（1）提供介质筛选及工艺开发的咨询。
（2）接受客户委托开发各种分离介质和分离工艺。
（3）按客户要求提供各种介质及相应规格的预装柱。
（4）为客户提供专业的售前和售后服务。

西宝提供的层析介质列表如下：

产品名称	琼脂糖亲和介质（镍）	琼脂糖亲和介质（谷胱甘肽）	琼脂糖亲和介质（肝素）	琼脂糖亲和介质（蓝胶）	琼脂糖亲和介质（蛋白A）
配基密度（ml介质）	15~120mmol	20~30 mmol	5 mg	7-10 μmol	6 mg
载量（ml介质）	20~30mg（LDH）	10mg GST	2mg抗凝血酶III	20mgBSA	35mgIgG（兔）
pH稳定性	3-13	3-12	4-12	4-12	2-11
粒径范围(μm)	45-165	45-165	45-165	45-165	45-165
最大流速(cm/h)	500	450	500	500	450
应用	用于含组氨酸标签蛋白的纯化	用于含GST标签蛋白的纯化	用于抗凝血酶III、凝血因子及干扰素等蛋白的纯化	用于白蛋白、干扰素、脂蛋白、凝聚因子等蛋白的纯化	用于多种抗体的纯化