蓝胶亲和介质

来源：seebio.cn作者：西宝生物人气：-发表时间：2012-07-18 11:18:00【大中小】

1、概述

琼脂糖亲和介质（蓝胶）通常简称为蓝胶，它是一种染料亲和介质，其配基（蓝色染料Cibacron Blue F3GA）是一种多芳香环的磺化物，具有与NAD+相似的空间结构，能与各种激酶、脱氢酶、血清白蛋白、DNA聚合酶等产生亲和吸附作用，从而达到分离纯化的目的。

琼脂糖亲和介质（蓝胶）的光学显微镜照

琼脂糖亲和介质（蓝胶）以高交联度琼脂糖为基质，具有高机械强度、高流速的特点，非特异性吸附少，配基泄漏低，可广泛用于蛋白纯化生产领域，如用于纯化磷酸激酶、水解酶、DNA和RNA核酸酶或聚合酶、合成酶、羟化酶、糖分解酶、磷酸二酯酶、脱羧酶以及血清白蛋白、血清脂蛋白、铁传递蛋白、干扰素等蛋白分子。

西宝提供的琼脂糖亲和介质（蓝胶）已被生化工程国家重点实验室、中科院生物物理所等单位广泛使用，应用效果良好。

2、 琼脂糖亲和介质（蓝胶）介质的应用

纯化百日咳疫苗

层析柱：4.2 cm ×1.0 cmI.D.，CV=3.3 ml
样品：预处理的百日咳培养液上清（15ml）
平衡缓冲液（A）：20mM NaAC-HAC, pH4.5
洗脱缓冲液（B）：20mM Tris-HCl, pH 8.5
洗脱缓冲液（C）：20mM Tris-HCl +1MMgCl2, pH 8.5
流速：1ml/min

上图为采用蓝胶纯化双组分百日咳疫苗的层析谱图。经过简单的层析分离后，目标峰（P2）中的百日咳毒素（PT）和丝状血凝素（FHA）的纯度大于85%，纯化倍数分别达到了9.2和13.6，纯化效果良好。

3、规格

产品名称	蓝胶亲和介质
配基密度
pH稳定性	4 ~ 12
粒径范围(μm)	45 ~ 165
最大流速(cm/h)	400
应用	用于白蛋白、需要核苷酸的酶、凝集因子等生物大分子的纯化
规格	50mL
	250 mL
	1 L

西宝可以提供的亲和层析列表如下：

产品名称	琼脂糖亲和介质（镍）	琼脂糖亲和介质（谷胱甘肽）	琼脂糖亲和介质（肝素）	琼脂糖亲和介质（蓝胶）	琼脂糖亲和介质（蛋白A）
配基密度（ml介质）	15~120mmol	20~30 mmol	5 mg	7-10 μmol	6 mg
载量（ml介质）	20~30mg（LDH）	10mg GST	2mg抗凝血酶III	20mgBSA	35mgIgG（兔）
pH稳定性	3-13	3-12	4-12	4-12	2-11
粒径范围(μm)	45-165	45-165	45-165	45-165	45-165
最大流速(cm/h)	500	450	500	500	450
应用	用于含组氨酸标签蛋白的纯化	用于含GST标签蛋白的纯化	用于抗凝血酶III、凝血因子及干扰素等蛋白的纯化	用于白蛋白、干扰素、脂蛋白、凝聚因子等蛋白的纯化	用于多种抗体的纯化