超大孔聚合物微球介质
为了实现生物大分子(如疫苗、多肽、PEG修饰蛋白等)快速、高效的分离纯化,西宝提供具有超大孔的聚合物微球介质。该介质具有孔径达200 nm-800 nm的超大孔,生物大分子与介质间的传质不受扩散作用的限制,能够在高流速下实现生物大分子的良好分离,同时有效保持生物大分子的活性。
超大孔聚合物介质的骨架为苯乙烯-二乙烯基苯的交联共聚物,具有机械强度高、耐酸碱、易清洗等优点。为了更加适合生物大分子的分离,中心进一步研发出具有亲水表面的超大孔微球介质,其亲水表面性能与常规琼脂糖介质相当。在此基础上,对具有亲水表面的超大孔微球介质进行衍生,可根据客户需要提供具有特定功能基团的介质。
表1 超大孔聚合物微球介质的理化性质
| 
             最可几孔径(nm)  | 
            
             平均粒径(μm)  | 
            
             骨架  | 
            
             表面性能  | 
            
             pH稳定性  | 
        
| 
             200  | 
            
             30-50  | 
            
             ST-DVB  | 
            
             疏水  | 
            
             2-12  | 
        
| 
             200  | 
            
             30-50  | 
            
             ST-DVB-Agarose  | 
            
             亲水  | 
            
             2-12  | 
        
| 
             200  | 
            
             30-50  | 
            
             ST-DVB-Agarose  | 
            
             亲水 弱阴离子  | 
            
             2-12  | 
        
| 
             200  | 
            
             30-50  | 
            
             ST-DVB-Agarose  | 
            
             亲水 强阳离子  | 
            
             2-12  | 
        
注:如需其他孔径或表面功能基的超大孔微球介质,请来电咨询。 
                       

图1 超大聚苯乙烯微球介质及表面孔结构的电镜照片
超大孔聚合物微球介质的应用:
西宝提供的超大孔聚合物微球介质由于具有数百纳米的大孔道,能够在高流速下操作,同时具有分辨率高、床层压力低、活性保持率高等突出优点。有效克服了常规介质由于孔径较小,生物大分子需要通过扩散作用进出介质,分离速度慢、活性降低等问题,已在多个生物大分子分离体系中获得成功应用。
生物大分子分离体系(一)
以肌红蛋白、转铁蛋白和牛血清白蛋白的混合溶液为模拟体系,考察不同流速下超大孔聚苯乙烯阴离子交换介质(DEAE-AP)的分离效果,并与DEAE Sepharose 4FF介质进行了对比。
实验结果显示,作为对照的DEAE-FF介质在流速达到361 cm/h时,分离效果已明显降低,而超大孔介质可以在流速高达1084 cm/h的条件下操作,分离效果良好,能够在6 min内实现三种生物大分子的快速分离。
大分子分离体系(二)
PEG修饰重组人粒细胞集落刺激因子(PEG-GCSF)产品的分离纯化。
西宝提供的超大孔介质在PEG修饰蛋白的分离纯化中已显示出突出的优势,以PEG-GCSF体系的分离纯化为例,对于作为对照的商品化琼脂糖介质,随着操作流速的提高,分离度明显下降,当流速达到612 cm/h时,混合物已经无法分离。而对于超大孔介质,当流速高达1224 cm/h时,依然可以实现产物的有效分离。
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