BINKIT(R) NK 细胞扩增套装（外周血单核细胞来源）
细胞结团的原因
悬浮细胞可能由于各种原因相互附着并发生结团。细胞结团最常见的原因是在细胞裂解之后，培养基中存在游离DNA和细胞碎片，DNA的粘性使细胞和其他碎片聚集成大的团块。
工艺培养过程中分析细胞结团的原因来自两方面：
1 动物细胞本身可能存在固有的细胞结团现象，如CHOS细胞；
2 动物细胞在遇到不良的营养条件和环境，也容易发生细胞聚集现象，以及培养基中Ca2+等离子的浓度也会影响细胞黏附[1]。
聚团后的影响
细胞微环境会发生恶化如：
- 氧气供应不足
- 代谢废物积累
- 营养物不足等
- 细胞死亡
如何抗细胞结团？
抗细胞结团常采用的物质是多硫酸化合物，例如：肝素钠、硫酸乙酰肝素、苏拉明和硫酸葡聚糖。在多种多硫酸盐化合物中，硫酸葡聚糖是在CHO细胞悬浮培养中应用最广泛的抗结团剂。
硫酸葡聚糖抗细胞结团原理
葡聚糖硫酸钠（Dextran sulfate sodium salt，DSS）是葡聚糖的聚阴离子衍生物，由葡聚糖和氯磺酸的酯化反应形成，以钠盐形式提供，并通过添加少量磷酸盐进行稳定。
不同分子量和浓度的硫酸葡聚糖的影响[1]
2016年，科学家研究了硫酸葡聚糖的三种不同分子量（4000Da、15000Da和40000Da，其对应的S比例分别为3-6%、17-19%和15-19%），以及不同浓度（0.1-1.0g/L）对两种不同重组CHO细胞（CHO-K1细胞和DG44细胞）的生长和单克隆抗体产量影响。并同时评估添加硫酸葡聚糖对单抗的关键质量属性（如聚体、电荷变化和N-糖基化等)的影响。
前期研究发现，采用200000Da的硫酸葡聚糖，无论使用哪种浓度（0.1-1.0g/L），都会使最大活细胞密度和抗体浓度降低20-30％。说明采用200000Da的硫酸葡聚糖对细胞来说是有害。添加上述不同分子量不同浓度的硫酸葡聚糖对于CHOK1细胞，可以显著维持培养后期细胞密度和活力，需要注意的是最终抗体表达并未对应提高。
而对于DG44细胞添加硫酸葡聚糖，尤其是40,000Da分子量对于DG44细胞，细胞聚集会大大降低。并且显著提高了抗体产物浓度。
另外通过硫酸葡聚糖对抗体质量属性的影响研究表明对于DG44细胞添加4000Da和15000 Da硫酸葡聚糖对单克隆抗体的电荷异构体无影响(P<0.05)，只有添加40,000Da硫酸葡聚糖才显著降低碱性电荷异构体(P<0.05)[1]；
添加硫酸葡聚糖对单克隆抗体的质量属性(聚体、电荷异构体和N -糖基化)没有负面影响，甚至可以对部分质量属性产生积极影响，如影响单克隆抗体的电荷异构体，降低碱峰。
总之，对于细胞生长、抗体产量和质量的影响取决于硫酸葡聚糖的分子量、浓度和CHO细胞系的选择。因此，针对不同CHO细胞系，建议优化最佳的硫酸葡聚糖的分子量和浓度，以最大发挥硫酸葡聚糖在单克隆抗体生产中的有益作用。[1]
目前也有很多用硫酸葡聚糖钠盐,Mw 5,000 ，平均分子量约5 kD，可通过改变细胞表面的电荷，来促使单个细胞悬浮，防止细胞结团，支持细胞高密度培养，提高细胞活力。
Seebio®提供高品质葡聚糖硫酸钠
产品指标及特点
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总硫含量
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15~20%
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硫酸根含量
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≤0.2%
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热失重（105℃，2h）
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≤10.0%
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pH
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5.0~7.5
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旋光度
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+75°~ +105°
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铁离子
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≤2.0%
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氯离子含量
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≤1000ppm
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外观
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白色~淡黄色粉末
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微生物限度
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需氧菌＜10^5 cfu/g
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霉菌、酵母菌总数
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＜100cfu/g
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内毒素
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＜5EU/g
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1、 性能优良：纯度高，含硫量15~20%；
2、 稳定性高：聚阴离子复合物，可溶于水，形成无色溶液，形似天然粘多糖；
3、 内毒素低：低于5EU/g，对细胞伤害较小。
订购信息
各类不同用途葡聚糖硫酸钠（DSS）
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葡聚糖硫酸钠
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肠炎模型
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分子生物学
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抗病毒
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抗凝血剂
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抗血脂剂
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化妆品研发
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6000-8000
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8000（平均）
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36000-50000
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400000-600000
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1400000（平均）
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货号
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产品名称
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平均分子量
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包装
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硫酸葡聚糖钠（DSS）
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Mw 3,000
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100g,500g,5Kg,25Kg
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Mw 5,000
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100g,500g,5Kg,25Kg
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1840080
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Mw 8,000
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100g,500g,5Kg,25Kg
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Mw 15,000
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100g,500g,5Kg,25Kg
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Mw 40,000
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100g,500g,5Kg,25Kg
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Mw 36,000~50,000
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50g,100g
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Mw 500,000
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100g,500g,5Kg,25Kg
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西宝生物可以提供各种规格的硫酸葡聚糖钠，平均分子量从3,000~500,000，欢迎致电400-021-8158.
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| 官网：www.cxbio.com | 微信服务号：iseebio | 微博：seebiobiotech |
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| 商城：mall.seebio.cn | 微信订阅号：seebiotech | 泉养堂：www.canmedo.com |
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