高分子β-淀粉样蛋白寡聚体ELISA试剂盒Wako Ver.2
高分子β-淀粉样蛋白寡聚体ELISA试剂盒Wako Ver.2High Molecular Amyloid β Oligomer ELISA Kit Wako Ver.2
免疫化学用 for Immunochemistry
制造商：FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation
保存条件：冷藏（冰冻运输）
◆试剂盒内容
96次用
抗体固相化孔板——1个
标准溶液（10 nM）——100 μL
缓冲液——60 mL
生物素偶联抗体（BAN50）溶液——100 μL
过氧化物酶偶联链霉亲和素溶液——100 μL
显色剂1——6 mL
显色剂2——6 mL
洗涤液（10×）——100 mL
标准品制备溶液——12 mL
血浆血清用样品制备溶液——50 mL
封板贴——4张
◆特点
● 可检测血浆、血清、脑脊液样品
● 可特异性地对9-mer以上的高分子Aβ寡聚体进行定量
◆试剂盒功能
|
标准曲线范围※1
|
0.41~100 pM（人脑脊液）
0.16~40 pM（人血清及EDTA抗凝血浆）
|
|
反应Aβ寡聚体
|
≧9mer的Aβ寡聚体
|
|
检测对象样品
|
血清、EDTA抗凝血浆、脑脊液、in vitro Aβ寡聚体
|
|
所需样品量
|
人脑脊液：25 μL（4倍稀释）
人血清、血浆（EDTA）：50 μL（2倍稀释）
|
|
检测时间
|
4.5 ｈ
|
|
检测方法※2
|
发光法
|
※1 基于16-mer多抗原肽（MAP）标准品的换算值。
※2 检测时需要准备酶标仪。
◆检测原理
本系列采取双抗体夹心法ELISA，使用抗Aβ抗体（BAN50）作为捕获抗体和检测抗体，与1~8-mer几乎不发生反应，与9-mer以上的Aβ寡聚体则发生特异性反应。使用带有16个抗Aβ抗体（BAN50的抗体识别序列的16-mer MAP肽作为标准品。
 |
 |
◆高分子Aβ寡聚体的特异性数据
将Aβ1-42肽冷藏并孵育过夜后，通过超滤分离为不足30 kDa（8聚体以下）和30 kDa以上（9聚体以上），并使用Aβ抗体（BAN50）对各组进行Western Blot和ELISA（本方法）检测。
 |
 |
8聚体以下（＜30 kDa）的Fraction B几乎检测不到信号；9聚体以上（≥30 kDa）的Fraction A则检测到强烈的信号。
◆检测案例
检测案例1：加标回收和稀释度线性测试
|
人血浆样品
|
未添加
|
+0.5 pM标准溶液
|
+1 pM标准溶液
|
+5 pM标准溶液
|
+30 pM标准溶液
|
||||
|
检测值
|
检测值
|
Recovery
|
检测值
|
Recovery
|
检测值
|
Recovery
|
检测值
|
Recovery
|
|
|
1.85 pM
|
2.36 pM
|
102%
|
2.85 pM
|
100%
|
7.11 pM
|
105%
|
31.2 pM
|
97.80%
|
|
|
人血清样品
|
未添加
|
+0.5 pM标准溶液
|
+1 pM标准溶液
|
+5 pM标准溶液
|
+30 pM标准溶液
|
||||
|
检测值
|
检测值
|
Recovery
|
检测值
|
Recovery
|
检测值
|
Recovery
|
检测值
|
Recovery
|
|
|
1.58 pM
|
2.07 pM
|
98%
|
2.59 pM
|
101%
|
6.64 pM
|
101%
|
31.9 pM
|
101%
|
|
|
人脑脊液①
|
未添加
|
+3 pM标准溶液
|
+6 pM标准溶液
|
+15 pM标准溶液
|
|||
|
检测值
|
检测值
|
Recovery
|
检测值
|
Recovery
|
检测值
|
Recovery
|
|
|
5.16 pM
|
8.01 pM
|
95%
|
10.6 pM
|
91%
|
18.1 pM
|
86%
|
|
|
人脑脊液②
|
未添加
|
+10 pM标准溶液
|
+15 pM标准溶液
|
+35 pM标准溶液
|
|||
|
检测值
|
检测值
|
Recovery
|
检测值
|
Recovery
|
检测值
|
Recovery
|
|
|
29.1 pM
|
38.8 pM
|
97%
|
44.0 pM
|
99.30%
|
59.9 pM
|
88%
|
|
检测案例2：检测临床样品（脑脊液）
用本ELISA法检测非认知症患者（Control）、轻度认知障碍患者（MCI）阿尔茨海默病（AD）患者的脑脊液。
|
年龄
|
性别
|
MMSE※3
|
脑脊液Aβ寡聚体（pM）
|
|
|
Control
n=5 |
69
|
M
|
30
|
2.37
|
|
60
|
F
|
30
|
1.65
|
|
|
59
|
M
|
30
|
2.82
|
|
|
46
|
M
|
28
|
2.24
|
|
|
60
|
F
|
29
|
1.34
|
|
|
MCI
n=5 |
69
|
F
|
24
|
3.6
|
|
76
|
M
|
23
|
2.62
|
|
|
82
|
M
|
26
|
2.33
|
|
|
69
|
F
|
23
|
2.67
|
|
|
73
|
F
|
25
|
2.34
|
|
|
AD
n=8 |
79
|
F
|
10
|
3.56
|
|
88
|
M
|
24
|
3.13
|
|
|
62
|
M
|
16
|
4.13
|
|
|
78
|
M
|
13
|
3.95
|
|
|
63
|
M
|
14
|
3.88
|
|
|
74
|
F
|
16
|
3.25
|
|
|
76
|
M
|
19
|
3.69
|
|
|
84
|
M
|
16
|
4.34
|
※3：MMSE score：认知功能诊断问诊检查的分数
※3：MMSE score：30-28分：正常
※3：MMSE score：27-24分：怀疑有轻度认知障碍
※3：MMSE score：23分以下：怀疑严重认知症
 |
 |
非认知症患者（Control）、轻度认知障碍患者（MCI）阿尔茨海默病患者（AD）间的检测值差异明显。
结果表明，高分子Aβ寡聚体的检测值与MMSE Score相关。
◆对比表
|
产品名称
|
High Molecular Amyloid β Oligomer ELISA Kit Wako Ver.2
|
High Molecular Amyloid β Oligomer ELISA Kit Wako
|
|
产品编号
|
290-82001
|
298-80101
|
|
标准曲线范围※1
|
0.41～100 pM（人脑脊液）
0.16～40 pM（人血清及EDTA抗凝血浆） |
0.410~100 pM（人脑脊液）
|
|
反应Aβ寡聚体
|
≧9 mer的Aβ寡聚体
|
≧9 mer的Aβ寡聚体
|
|
检测对象样本
|
人血清、EDTA抗凝血浆、
脑脊液in vitro Aβ寡聚体
|
人脑脊液
|
|
in vitro Aβ寡聚体
|
||
|
必要样本体积
|
人脑脊液：25 μL（4倍稀释）
人血清及EDTA抗凝血浆：50 μL（2倍稀释） |
人脑脊液：25 μL（4倍稀释）
|
|
检测时间
|
4.5 h
|
4.5 h
|
|
检测方法※2
|
发光法
|
发光法
|
※1 基于16-mer多抗原肽（MAP）标准品的换算值。
※2 检测时需要准备酶标仪。
产品列表
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 |
| 290-82001 | High Molecular Amyloid β Oligomer ELISA Kit Wako Ver.2 高分子β-淀粉样蛋白寡聚体ELISA试剂盒Wako Ver.2 |
96 次用 |
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