去端肽胶原，蜂窝海绵(Atelocollagen Honeycomb) - 3D培养和3D支架组织工程研究的有用工具

来源：作者：人气：-发表时间：2023-11-08 09:31:00【大中小】

去端肽胶原，蜂窝海绵

Atelocollagen Honeycomb

3D培养和3D支架组织工程研究的有用工具

◆背景

“蜂窝”胶原海绵具有方向统一、均匀的孔（200-400 μm），细胞可以穿透并在其中增殖密集地排列。这种结构有利于营养物质到海绵内为细胞做准备供应，并释放代谢废物和生化产物。细胞能够增殖且填充管腔，形成均匀的细胞团。

去端肽胶原蜂窝海绵 Atelocollagen Honeycomb Sponge (KOU-CSH-10) 为2 mm的立方体，应用于3D细胞培养物和高密度细胞培养基组织工程细胞支架	去端肽胶原蜂窝海绵 Honeycomb Disk 96 （KOU-CSH-96）直径为6 mm圆盘形，适用于96孔和高通量筛选细胞培养。
KOU-CSH-10 : stereoscopic microscope image 立体显微镜图像	KOU-CSH-96 : stereoscopic microscope image 立体显微镜图像
Electron microscope image of Honeycomb sponge 蜂窝海绵的电子显微图像	Electron microscope image of mouse fibroblast cell culture in 'Honeycomb collagen sponge 蜂窝胶原海绵小鼠成纤维细胞培养的电子显微镜图像

◆去端肽胶原的特点

去端肽胶原是由蛋白酶溶解的胶原，但是它的物理性质几乎与天然未加溶的胶原蛋白相同。而去端肽胶原更具有优越的特性。

◆特点与优点

“蜂窝”胶原海绵由高度纯化I型去端肽胶原制备（牛皮来源），并且可以通过胶原酶降解。

◆应用

3D培养

组织工程3D支架研究

◆使用实例

实例 1

NG1RGB人成纤维细胞在蜂窝圆盘（KOU-CSH-96）

	饲养层细胞/孔（×10³）	附着细胞于蜂窝圆盘96（×10³）
	10	2.2
	20	5.3
	40	8.6
细胞增殖：如图所示，在蜂窝圆盘96培养孔中接种。细胞增殖通过NADH依赖性燃料（WST-8）测定OD值。	细胞附着：圆盘培养如图所示，培养一天后转移至新培养孔，并测定细胞数，显示20%的细胞附着。

实例 2

胚体在蜂窝海绵支架体内移植后的胚体致畸移植

小鼠肾脏在海绵蜂窝支架移植（EB/+CSH）胚体移植后12周后，没有形成畸胎瘤的迹象，而无KOU-CSH-10（ES/-CSH）的所有小鼠胚体培养产生畸胎瘤。组织学上，移植ES/+CSH与相邻的主肾组织没有明显区别，表明没有具体的诱导自发分化难以区分。

方法：板中培养小鼠胚胎干（ES）细胞进行胰蛋白酶处理，通过尼龙网过滤，接种到96孔板（1×10⁴细胞/孔），培养5天，形成胚状体（EB）。当EB与蜂窝海绵（KOU-CSH-10）混合，EB迅速、均匀融入KOU-CSH-10的矩阵中。EB/+CSH复合物移植到6周龄小鼠的肾筋膜。

实例 3

体内小鼠胚胎干/间质细胞镶嵌球移植KOU-CSH-10支架后新生毛发。

方法：小鼠ES细胞和小鼠胚胎间充质细胞（MDU1）共培养以产生两种细胞的镶嵌球体。镶嵌球体与KOU-CSH-10去端肽胶原蜂窝海绵混合，在6周龄小鼠的背部肌肉移植。

<参考文献>
1. Suzuki T, et al. Growth inhibition and differentiation of cultured smooth muscle cells depend on cellular crossbridges across the tubular lumen of type I collagen matrix honeycombs. (2009) Microvasc Res. 77(2):143-149.

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