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重组蛋白和链酶亲和素(Streptavidin, SA)

来源:作者:西宝生物人气:-发表时间:2014-03-20 14:58:00【

蛋白A、蛋白G和蛋白L是微生物来源的天然或重组蛋白质,可以和哺乳动物的免疫球蛋白结合。将这些蛋白偶联于支持物上,利用亲和层析来纯化抗体,也可用于免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)或免疫共沉淀(Co-IP)。不同的抗体结合蛋白与不同的免疫球蛋白的结合能力并不一样,它们受到后者的来源及亚类的影响,因此对于不同的抗体需要选择不同的抗体结合蛋白。

蛋白A是葡萄球菌细胞壁的组成成分,42kD,能特异性的结合免疫分子的Fc区,特别是IgG. 有4个亲和结合位点,耐热和耐变性剂(4M尿素,6M盐酸胍);用途:可以广泛用于分离不同种属来源的哺乳动物IgG分子。

蛋白G是G型链球菌细胞壁的组成成分,主要与大多数哺乳动物的免疫球蛋白的Fc区结合,结合能力大于蛋白A;用途:主要用来纯化不能与蛋白A很好结合的单抗和多抗。不能结合人IgM,D,A。

蛋白L源于细菌Peptostreptococcus,是一种能和广泛的免疫球蛋白相结合的蛋白质,该蛋白只与抗体的k链结合而不会影响抗体的抗原结合位点,这一特性使其与蛋白A或蛋白G相比,能更广泛地结合各种来源及亚类的抗体。用途:它不结合牛、山羊或绵羊来源的免疫球蛋白,可以用于从添加BSA或FCS的培养液中纯化单克隆抗体。

链霉亲和素(Streptavidin,SA),是链霉菌在培养过程中分泌的一种蛋白质产物。SA的分子量为60Kda,内4条序列相同的肽链组成。如同亲合素一样,一个SA分子也能结合4个生物素分子,二者亲和常数亦为1015/mol。SA的每条肽链含159个氨基酸残基,其中赖氨酸、精氨酸等碱性氨基酸的含量比亲合素少,因此SA是一种稍偏酸性的蛋白质,其pI为5.5,并且不带糖基。

1.蛋白类产品和链酶亲和素

 

货号
英文名称
中文名称

液体
规格

冻干粉
规格

重组产品来源
188230
Recombinant Protein A
重组蛋白A
1mg/10mg/100mg
E. coli
应用:结合兔,猪,狗和猫的 IgG,结合抗体Fc区, 液体浓度:5mg/ml
188241
Recombinant Protein G
重组蛋白G
1mg/10mg/100mg
E. coli
应用:结合小鼠,人的IgG 亚型(IgG1, IgG2, etc.), 结合抗体Fc区,液体浓度6mg/ml
188250
Recombinant Protein A/G
重组蛋白A/G
5mg
 
E. coli
应用:结合来自于兔,小鼠,人或其他哺乳动物IgG, 结合抗体Fc区
188261
Recombinant Protein L
重组蛋白L
1mg/10mg
E. coli
应用:结合IgG, IgM, IgA, IgE and IgD, 结合抗体kappa轻链, 液体浓度:5mg/ml
188272
Strepavidin
链酶亲和素
1mg/10mg
 
应用:与亲和素连接,用于亲和层析, 液体浓度7-12mg/ml
 

免疫球结合蛋白的一般特性

 

重组蛋白A

重组蛋白

重组蛋白 A/G 

重组蛋白

天然来源

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)

链球菌(Streptococcus)

N/A

大消化链球菌(Peptostreptococcus magnus)

重组产品来源

E. coli

E. coli

E. coli

E. coli

分子量

44,600

21,600

50,460

35,800

SDS-PAGE

45 kDa

32 kDa

40-45 kDa

36 kDa

免疫球蛋白Ig结合位点数

4

2

6

4

白蛋白结合位点

No

No

No

No

适合结合pH值

8.2

5

5~8.2

7.5

Ig目标结合区

Fc

Fc

Fc

kappa轻链

 

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