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StemSure(R) 细胞冻存液人iPS细胞·小鼠 ES 细胞冻存用

来源：作者：人气：-发表时间：2025-10-22 10:02:00【大中小】

人iPS 细胞·小鼠 ES 细胞冻存用

StemSure® 细胞冻存液

本产品是可用于冻存以小鼠 ES 细胞为代表的各种通用细胞株的无血清型细胞冻存液。含 BSA 和 10% DMSO 。标准测试中用小鼠 ES 细胞 D3 株冻存、复苏，确认其细胞存活率。本产品采用缓慢冻存法冻存细胞，无需使用程序降温盒。

使用本产品对小鼠 ES 细胞 D3 株在 -80℃ 进行保存，可冻存２年；普通细胞在 -150℃ 下可冻存 30 个月，并且可维持很高的存活率。

另外，本产品已确认可用于冻存人 iPS 细胞。

◆特点

● 可在维持人 iPS 细胞、小鼠 ES 细胞未分化能力的状态下，直接进行冻存。

● 可在 -80℃ 下进行长时间冻存。

● 冻存的通用动物细胞株的细胞存活率好。

● 无血清型

● 无需自行配制试剂

● 无需使用程序降温盒

◆测试项目

● 细胞存活率时间（使用小鼠 ES 细胞 D3 株进行实验）

● 无菌实验

● 内毒素实验

● 支原体实验

◆使用方法

人 iPS 细胞的冻存

1. 冻存

① 去除人 iP S细胞培养皿中的营养液，用 PBS 清洗后，用 Accutase 等剥离细胞。

② 添加含有 10 μmol/L Y-27632的人 iPS 培养基（hPSC 培养基（+ROCKi）），用移液器吹打成单细胞。

③ 将吹打分散的细胞悬浮液移至样本管，离心（1,000 rpm，3 min，室温）后去除上清液。

④ 添加含 hPSC 培养基（+ROCKi）的培养基，用移液器悬浮。

⑤ 计算细胞数量。

⑥ 以１×10⁶cells/管分注在细胞悬浮液保存管中。

⑦ 离心（1,000 rpm，3 min，室温）后去除上清液。

⑧ 使用 50 μL/管本产品进行悬浮，在 -80℃ 下进行冻存。

2. 复苏

① 在冻存管中添加 hPSC 培养基（+ROCKi），复苏冻结细胞（不使用温水浴法）。

② 离心（1,000 rpm，3 min，室温）后去除上清，再次添加 hPSC 培养基（+ROCKi），悬浮。

③ 计算细胞数量。

④ 在培养皿中按照２×10⁵cells/6 cm 进行细胞培养。

小鼠ES细胞、通用动物细胞株的冻存

1. 冻存

① 收集细胞至样本管中。

② 离心，去除上清。

③ 在样本管中加入本产品，悬浮。

④ 分注至悬浮液保存管中。

⑤ 将保存管在-80℃冻洁一晚。

⑥ 保存于-150℃或-80℃

2. 复苏

① 将冻存管置于37℃的水浴槽中解冻。

② 在培养用的培养基中进行悬浮。

③ 离心去除上清后用培养基进行重悬。

④ 在培养容器内培养细胞。

◆人iPS 细胞 201B7 细胞系的冻存 Update！！

将人 iPS 细胞 201B7 株分散为单细胞后，在 StemSure^® 冻存液中悬浮，并在-80℃下冻存４天。反复冻结、复苏３次之后，确认细胞存活率和各种未分化标记（Oct3/4、Sox2、SSEA-4、Tra-1-81）的表达。

细胞生存率

未分化标记表达的确认

◆小鼠 ES 细胞 D3 细胞系的冻存

-150℃保存（30个月）

-80℃保存（24个月）

<冻存>

① 在 1 mL本产品中悬浮１~2×10⁶cells，分注至冻存管中。

② 在 -80℃冻存１天后转移至-150℃冻存。或者在-80℃冻存。

<复苏>

③ 在37℃的温浴槽中复苏。

④ 在细胞培养基中悬浮、离心。

⑤ 弃上清，用细胞培养基重悬细胞并进行培养。

○确认细胞集落形成

培养细胞数：500个细胞/孔（含胶原蛋白涂层的６孔板）

培养时间：10天

◆冻存通用动物细胞系后的细胞存活率

用 StemSure^®细胞冻存液冻存各种动物细胞株。可确认到冻存30个月后仍维持高存活率，且复苏后细胞可移植。

细胞种类	存活率（%）			细胞移植
细胞种类	2个月	4个月	30个月	细胞移植
人
HeLa	97	93	97	○
293T	96	95	95	○
K562	91	84	84	○
灵长类
COS-7	97	93	92	○
Vero	95	94	91	○
狗
MDCK	98	99	100	○
小鼠
NIH/3T3	93	93	89	○
P19	93	76	77	○
STO	90	91	91	○
L929	94	90	91	○
仓鼠
CHO	97	96	98	○

<冻存>

① 在 1 mL本品中悬浮 1~2×10⁶cells，分注至冻存管中。

② 在-80℃冻存1天后转移至-150℃分别冻存２个月、４个月、30个月。

<复苏>

③ 在37℃的水浴槽中复苏。

④ 细胞培养用培养基中悬浮、离心。

★其他冻存液★

产品编号	产品名称	规格	容量
031-24051	CultureSure™ DMSOCultureSure™ 二甲基亚砜	细胞培养用	10 mL×10
039-23511	CultureSure™ Freezing Medium 通用动物细胞用冻存液	细胞培养用	10 mL

◆相关产品

★StemSure^® 系列★

本系列产品适用于培养 ES 细胞和 iPS 细胞。每个批次产品都适用小鼠 ES 细胞 D3 细胞系进行品质实验检测。

产品编号	产品名称	规格	容量
197-16275	StemSure^® D-MEM (High Glucose) with Phenol Red and Sodium Pyruvate StemSure^® D-MEM（高糖）含酚红和丙酮酸钠	细胞培养用	500 mL
191-18375	Stemsure^® Serum Replacement Stemsure^® 血清替代品	细胞培养用	500 mL
198-15781	StemSure^® 10 mmol/L 2-Mercaptoethanol Solution ( × 100) StemSure^® 10 mmol/L 2-巯基乙醇	细胞培养用	100 mL
195-15791	StemSure^® 50 mmol/L Monothioglycerol Solution ( × 100) StemSure^® 50 mmol/L 硫代甘油	细胞培养用	100 mL
190-15805	StemSure^® 0.1w/v% Gelatin Solution StemSure^® 0.1w/v%明胶溶液	细胞培养用	500 mL
199-16051	StemSure^® LIF, Mouse, recombinant, Solution StemSure^® 白细胞抑制因子溶液，小鼠，重组	细胞培养用	10⁶ units
195-16053	StemSure^® LIF, Mouse,recombinant, Solution StemSure^® 白细胞抑制因子溶液,小鼠，重组	细胞培养用	10⁶units×10