当前位置：首页 » 资讯中心 » 生命科学

重组蛋白纯化检测用 TARGET标签系统

来源：作者：人气：-发表时间：2025-04-16 12:34:00【大中小】

重组蛋白纯化检测用

TARGET标签系统

◆特点

●　通过树脂再生，降低运作成本

●　温和洗脱、清洗，实现高纯度

●　在动物细胞表达系（HEK293T细胞、CHO细胞等）中有效纯化蛋白

TARGER标签系统使用的是可识别肽标签（21个氨基酸残基）的单抗（P20.1），是日本开发的亲和纯化标签系统。

TARGET标签系统实践证明，即使在传统系统都难以进行高纯度蛋白纯化的动物细胞表达系中，也可有效地进行亲和纯化。

◆TARGET标签系统

A rapid screening method for cell lines producing singly-tagged recombinant proteins using the“ TARGET tag”system. Tabata S. et al., J. Proteomics, 2010 Aug 5;73(9):1777-85.

◆TARGET 标签表达载体示意图

产品选择

载体	表达模式	宿主细胞	MCS启动子
pEBMulti	非整合型稳定表达	灵长类（人、猴）、狗细胞等贴壁细胞	CAG
pCAG	瞬时表达	灵长类（人、猴）、狗细胞等贴壁细胞、大/小鼠等动物细胞	CAG

富士胶片和光还推出除上述抗性基因载体外的其他载体。（请点击查看）

测序用引物序列、其他载体序列的相关详细信息，已附在产品随货说明书中。

另外可点击富士胶片和光主页/TARGET标签，查看序列信息、多克隆位点(MCS)信息。

TARGET标签融合蛋白的免疫沉淀

通过Transient 载体，

表达TARGET标签融合重组蛋白

培养上清（培养第7天）

每10 mL中，分别添加0.1 mL（net 0.05 mL）的抗体磁珠（①抗TARGET标签抗体琼脂糖珠、②抗DYKDDDDK标签抗体琼脂糖珠，其他公司产品），4℃条件下，进行2小时免疫沉淀。

清洗后，在回收的各珠中分别添加0.5 mL 0.2 mg/mL

TARGET标签肽/TBS和0.2 mg/mL DYKDDDDK肽/TBS，4℃条件下，平稳震动0.5小时。离心后回收上清。

再分别在各珠中添加0.5 mL 0.1 M Glycine-HCl (pH 2.7)，室温下，平稳震动5分钟。离心后，回收上清并用1M Tris-HCl (pH 9.0)中和。

上图为SDS-PAGE处理后的银染结果。

与传统DYKDDDDK tag相比，背景更低

→高纯度！

　M：M.W. Marker

　1.仅转染载体的培养上清

　2.转染了蛋白Y-TARGET 标签表达质粒的细胞培养上清

　3.转染了TARGET标签-蛋白Y 表达质粒的细胞培养上清

　　也可使用市售的Transient载体

确认非整合型载体TARGET tag C端融合重组蛋白的表达

利用可编码表达人源生理活性蛋白基因的质粒转染 HEK293N 细胞后，从初期细胞数 3×10⁵cells/mL 开始培养，回收 0/3/7 日的培养上清。用 20 μL/lane 的培养上清进行 SDS-PAGE 处理，通过银染和 Western blotting，检测出蛋白的表达。
可确认到与市面售卖的 Tag 系统有相同的表达量和检测灵敏度。

◆TARGET 标签系列

产品名称	子类克隆号		适用实验	规格	产品编号	包装
单抗
抗TARGET标签，单抗 Anti TARGET tag，Monoclonal Antibody		小鼠 IgG₁ P20.1	IP, WB	免疫化学用	016-25481	200 μg
					012-25483	1 mg
HRP标签单抗
抗 TARGET tag，单抗，过氧化酶结合 Anti TARGET tag, Monoclonal Antibody (P20.1) Peroxidase conjugated		小鼠 IgG₁ P20.1	WB	免疫化学用	015-25571	200 μL
					011-25573	1 mL

产品名称	子类克隆号	规格	产品编号	包装
抗体结合琼脂糖珠
抗 TARGET 标签抗体琼脂糖珠 Anti TARGET tag Antibody Beads	小鼠 IgG₁ P20.1	免疫化学用	018-25561	2 mL (Net 1 mL)
			014-25563	10 mL (Net 5 mL)
			012-25564	50 mL (Net 25 mL)
识别 N 端、C 端的 TARGET 标签使用载体：4% 琼脂糖溶液组成：1×TBS (pH 7.5)，0.05 w/v%叠氮化钠抗体结合量：2.0 mg/mL 结合容量：1 mL 本品可结合约 0.1-1.0 mg 的 TARGET 标签融合蛋白

产品名称	备注	规格	产品编号	包装
肽
TARGET标签肽 TARGET tag Peptide	含量（HPLC）95%以上	基因研究用	200-19673	5 mg
TARGET标签肽 TARGET tag Peptide	含量（HPLC）95%以上	基因研究用	208-19674	25 mg
清洗液
TARGET标签清洗液 TARGET tag Washing Solution	已过滤消毒即用型	基因研究用	208-19831	50 mL

产品名称	可选 Marker		产品编号	包装
	大肠杆菌	动物细胞
瞬时表达载体
C端插入TARGET标签的pCAG-Ble载体 pCAG-Ble TARGET tag-C	博莱霉素		165-26381	20 μg
N端插入TARGET标签的pCAG-Ble载体 pCAG-Ble TARGET tag-N	博莱霉素		162-26391	20 μg
C端插入TARGET标签的pCAG-Bsd载体 pCAG-Bsd TARGET tag-C	杀稻瘟素S		165-26401	20 μg
N端插入TARGET标签的pCAG-Bsd载体 pCAG-Bsd TARGET tag-N	杀稻瘟素S		162-26411	20 μg
C端插入TARGET标签的pCAG-Hyg载体 pCAG-Hyg TARGET tag-C	潮霉素B		169-26421	20 μg
N端插入TARGET标签的pCAG-Hyg载体 pCAG-Hyg TARGET tag-N	潮霉素B		166-26431	20 μg
C端插入TARGET标签的pCAG-Neo载体 pCAG-Neo TARGET tag-C	卡那霉素	G418	163-26441	20 μg
N端插入TARGET标签的pCAG-Neo载体 pCAG-Neo TARGET tag-N	卡那霉素	G418	160-26451	20 μg
游离载体
C段插入TARGET标签的pEBMulti-Ble载体 pEBMulti-Ble TARGET tag-C	博来霉素		167-26461	20 μg
N段插入TARGET标签的pEBMulti-Ble载体 pEBMulti-Ble TARGET tag-N	博来霉素		164-26471	20 μg
C段插入TARGET标签的pEBMulti-Bsd载体 pEBMulti-Bsd TARGET tag-C	杀稻瘟素S		161-26481	20 μg
N段插入TARGET标签的pEBMultI-Bsd载体 pEBMulti-Bsd TARGET tag-N	杀稻瘟素S		168-26491	20 μg
C段插入TARGET标签的pEBMulti-Hyg载体 pEBMulti-Hyg TARGET tag-C	潮霉素B		161-26501	20 μg
N段插入TARGET标签的pEBMulti-Hyg载体 pEBMulti-Hyg TARGET tag-N	潮霉素B		168-26511	20 μg
C段插入TARGET标签的pEBMulti-Neo载体 pEBMulti-Neo TARGET tag-C	卡那霉素	G418	165-26521	20 μg
N段插入TARGET标签的pEBMulti-Neo载体 pEBMulti-Neo TARGET tag-N	卡那霉素	G418	162-26531	20 μg
C段插入TARGET标签的pEBMulti-Puro载体 pEBMulti-Puro TARGET tag-C	氨苄青霉素	嘌呤霉素	169-26541	20 μg
N段插入TARGET标签的pEBMulti-Puro载体 pEBMulti-Puro TARGET tag-N	氨苄青霉素	嘌呤霉素	166-26551	20 μg

◆相关产品

内参照

下表为 Western Blot 实验中参照用单抗一览表。

产品名称	规格	产品编号	包装
抗β肌动蛋白单抗 Anti β-Actin，Monoclonal Antibody	免疫化学用	013-24553	200 μg
		011-24554	1 mg
		017-24556	5 mg
抗β肌动蛋白单抗,过氧化物酶标记 Anti β-Actin，Monoclonal Antibody，Peroxidase Conjugated	免疫化学用	017-24573	200 μL
抗α-微管蛋白，单抗 Anti α-Tubulin，Monoclonal Antibody	免疫化学用	011-25034	10 μg
		017-25031	200 μg
		013-25033	1 mg
Anti β-Tubulin，Monoclonal Antibody 抗β-微管蛋白，单抗	免疫化学用	018-25044	10 μg
		014-25041	200 μg
		010-25043	1 mg
Anti GAPDH，Monoclonal Antibody 抗GAPDH，单抗	免疫化学用	016-25523	200 μg
		014-25524	1 mg
		010-25526	5 mg
Anti GAPDH，Monoclonal Antibody，Peroxidase Conjugated 抗GAPDH，单抗，过氧化酶结合	免疫化学用	015-25473	200 μL

蛋白酶抑制剂系列

产品名称	规格	产品编号	包装
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒 I，无动物源成分（通用型） Protease Inhibitor Cocktail Set I, Animal-derived-free (for general use) (×100), Lyophilized	通用型	165-26021	1 mL用
	通用型	161-26023	1 mL用×5
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒III, DMSO溶液（不含EDTA）（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set III, DMSO Solution (EDTA free) (×100)	动物细胞	163-26061	1 mL
	动物细胞	169-26063	1 mL×5
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒V （无EDTA）（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set V (EDTA free) (×100), Lyophilized	2D电泳	162-26031	1 mL
	2D电泳	168-26033	1 mL×5
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒 VI，DMSO溶液，用于植物（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set VI, DMSO Solution (for Plant) (×100)	植物细胞	164-26091	1 mL
	植物细胞	160-26093	1 mL×5
蛋白酶抑制剂混合物试剂盒VII，DMSO溶液，组氨酸标签蛋白（×100） Protease Inhibitor Cocktail Set VII, DMSO Solution (for Histidine-tagged Protein) (×100)	His Tag 纯化^※	167-26101	1 mL
	His Tag 纯化^※	163-26103	1 mL×5