生物制品无血清培养基关键添加剂——Bovine Transferrin 牛转铁蛋白

来源：作者：人气：-发表时间：2020-09-24 14:42:00【大中小】

Transferrin结构图

转铁蛋白(Transferrin)于1945年首先在人血清中发现，为无血清培养基必需添加物组分，通过与转铁蛋白受体(Transferrin Receptor, TfR) 相互作用，在无血清细胞培养过程中发挥重要功能。转铁蛋白能与三价铁离子可逆性结合，调节铁离子转运及代谢，维持细胞内的铁平衡。我们对转铁蛋白的转铁作用都很了解，但其实它重要的意义在于维持细胞的生长和增殖，也就是说它有类似于生长因子的功能。而且，转铁蛋白也是一种重要的胞外抗氧化剂，可以避免细胞外环境中自由基的产生，防止细胞受到伤害。

无血清培养基添加物，日益受到科研和生物制药用户的青睐。目前，已有多种无血清培养基上市，如杂交瘤细胞无血清培养基、CHO细胞无血清培养基、Vero细胞无血清培养基和NS0 细胞无血清培养基等。转铁蛋白，是一种无血清培养基补充剂，可用于生物制品及特殊培养基，增强在无血清培养中的杂交瘤、中国仓鼠卵巢（CHO）和其他哺乳动物真核细胞生长。

西宝生物为您提供高品质高纯度牛转铁蛋白(Bovine Transferrin)，经热处理以冻干粉形态出品，确保了产品安全和高质量标准。该产品品质稳定，常备现货，可用于生物制品、重组蛋白、单克隆抗体生产等领域。牛转铁蛋白(Bovine Transferrin)咨询热线：400-021-8158

转铁蛋白的应用背景：

无血清细胞培养基（serum free medium， SFM）是指在使用中无需添加血清的细胞培养基，且其组成成分不含有动物组分。按照其组分分类，还可以分为无动物组分无血清细胞培养基和化学限定无血清细胞培养基，前者组分中可能含有某些植物来源成分，而后者由化学成分明确的组分组成。其中，无动物组分无血清细胞培养基是目前在生物制药行业中应用广泛，它提高了细胞培养的质量，避免了使用血清带来的麻烦。无血清培养基通常添加生长附加成分，如激素与生长因子、低分子营养成分和转铁蛋白等促细胞生长的附加成分，一般包括胰岛素、孕酮、硒酸钠、腐胺、转铁蛋白等。转铁蛋白产品可增强在无血清培养中的杂交瘤、中国仓鼠卵巢（CHO）和其他哺乳动物真核细胞生长。

Seebio转铁蛋白产品简介：

转铁蛋白是血浆中主要的铁传递蛋白，为细胞内化和细胞代谢提供所需的铁。研究发现所有的细胞生长都离不开转铁蛋白。不但维持正常的细胞代谢依赖于以生物活性形态存在的铁，铁还是一些酶的辅助因子，比如RNA聚合酶，DNA合成酶。同时也是血红蛋白的重要组成部分。

转铁蛋白是血浆糖蛋白，从血浆中分离而来，牛转铁蛋白以两种分子形态存在，即分子量分别为74KD和78KD。每个转铁蛋白分子通过C端和N端结构位点可以结合两分子铁离子，所以转铁蛋白以三种形态存在：脱铁（不结合铁离子），饱和铁（结合两分子铁离子）和部分饱和，在生理情况下，转铁蛋白分子仅有1/3被铁饱和。

Seebio牛转铁蛋白产品质量源头开始控制，牛血浆从正规农场定制，进行正规的检验检疫。经过多步色谱纯化得到的转铁蛋白，需进行60℃，10h的病毒灭活，然后用0.1μm滤膜过滤。产品最后要进行包括纯度，内毒素，酸碱度，铁含量，水分，微生物限度等检查，以确保产品符合细胞培养要求。西宝生物提供的Bovine Transferrin（牛转铁蛋白）以高纯度、热处理、冻干粉状态提供，并有脱铁（apo）或饱和铁（holo）两种形式。

牛转铁蛋白(Bovine Transferrin)产品性质：

来源（Source）	牛血浆
CAS：（CAS Number）	11096-37-0
外观（Appearance）	类白色冻干粉
pH(3% w/v soln)	6.0-8.0
纯度（Purity）	≥95%（w/w总蛋白）
总蛋白（Total Protein）	≥95%w/w
生物负载（Bioburden）	≤100cfu/g
内毒素（Endotoxin）	≤5EU/mg
溶解性（Solubility）	用PBS或者其它合适的溶剂在室温下溶解0.5-2.0mg/ml
支原体（Mycoplasma）	Not Detected
应用须知 (Application Notes）	牛转铁蛋白（HOLO）经常在细胞和微生物培养中用作营养物质，并在生物制药生产中用作培养基补充。牛全运铁蛋白可用于多种细胞类型。
其他说明（Other instructions）	除非另有说明，否则Seebio的产品仅用于研究或进一步制造用途，不能直接用于人类。

转铁蛋白的主要应用：

用作铁转运蛋白（Iron-transport protein)，几乎所有培养基中都是必不可少的细胞培养添加剂，是无血清和低血清培养基中关键组成成分。
起到生长因子的作用，提高体外培养细胞的性能。
用作重组蛋白和生物制药生产发酵培养基的一种营养添加剂。能提高单克隆抗体生产产量。
用作毒性金属离子的螯合剂，能够清除溶液中有害的多价阳离子，起到解毒作用。
用作分子量标准蛋白。
用作受体以介导DNA等分子转染进入细胞。

转铁蛋白促进细胞外铁的储存和运输。转铁蛋白是重要的细胞外抗氧化剂。它们在生理条件下如此紧密地结合铁，以至于几乎不存在游离铁来催化自由基的产生。转铁蛋白向细胞输送铁是一个受体介导和控制的过程。细胞通过改变转铁蛋白受体表达来调节它们从细胞外环境中接受的铁量，转铁蛋白对于绝大部分细胞系在无血清培养基中生长是必需的，研究表明饱和铁形态的转铁蛋白对于促进细胞生长是有效的形态。转铁蛋白产品可增强杂交瘤、中国仓鼠卵巢（CHO）和其他哺乳动物真核细胞在无血清培养中的生长。

不同细胞，对转铁蛋白的需求量不同，一般原代细胞的推荐浓度为5 -100mg/L；中国仓鼠卵巢细胞(CHO)推荐浓度为10 -50mg/L；杂交瘤和Vero细胞推荐浓度为5 -20mg/L。具体使用浓度还是要根据细胞的种类、状态和想要实现的功能来通过实验确定。

常见问题解答：

Q1：培养基中应该添加铁饱和(Holo)转铁蛋白，还是脱铁(Apo)转铁蛋白?
答：当培养基中不含铁或铁含量较低时，选择添加铁饱和(Holo)的转铁蛋白；当培养基中富含铁时，选择脱铁转铁蛋白。

Q2：铁饱和(Holo)的转铁蛋白和脱铁(Apo)的转铁蛋白，哪个效果好?
答：无法从理论上推断出两者的效果好坏，需要通过实验检测。

储存条件：

转铁蛋白冻干粉需要保存在冷藏状态下，使用之前再溶解。一般用PBS或者其它合适的溶剂在室温下将转铁蛋白冻干粉溶解成储液，浓度在0.5-2.0mg/ml,然后用无菌滤膜进行过滤，滤液可在无菌条件下2-8℃保存30天，长期保存请分装后存放于-80℃。

产品目录：

货号	产品名称	规格	储存条件
DBM0012G-100mg	Bovine Transferrin (APO) 牛脱铁转铁蛋白	100mg	4℃
DBM0012G-1g	Bovine Transferrin (APO) 牛脱铁转铁蛋白	1g	4℃
DBM0012A-100mg	Bovine Transferrin (HOLO) 牛饱和铁转铁蛋白	100mg	4℃
DBM0012A-1g	Bovine Transferrin (HOLO) 牛饱和铁转铁蛋白	1g	4℃