【新品速递】Cisbio 药物靶标胞外激酶（Kinase）活性检测整体解决方案

来源：作者：人气：-发表时间：2019-07-01 14:12:00【大中小】

什么是激酶？

激酶(kinase)是一种特殊的酶，可以将磷酸基团从高能量供体分子（如ATP）转移到特定靶分子（底物），这一过程称为磷酸化。许多肿瘤的发生是由某些与生长相关的“激酶”发生突变导致异常活化引起的，因而激酶抑制剂如能有效抑制突变激酶的活性，就能达到抑制癌细胞增长的目的。

激酶研究的意义：

激酶（Kinase）是重要和超大的家族药物靶标，包含518个成员，是制药工业和学术研究的主要研究领域。激酶信号传导途径在调节细胞增殖、代谢和死亡中起着重要作用，因此激酶活性的变化可能会导致包括癌症在内的各种疾病形态。因而，激酶的上述重要特征使其成为药物筛选和发现中重要的目标家族之一。在过去几年中，科研人员不断地增加激酶作为重要药物的识别靶标。截至目前，FDA已经批准了超过30种激酶抑制剂。现代新药研发的关键首先是寻找、确定和制备药物作用靶点。在500多个已发现的药物靶点里中，GPCR，Ion Channel，Kinase的使用广泛。

为了支持激酶类药物的筛选、发现与开发，西宝生物携手Cisbio为您提供多种激酶类型，从检测方法优选、高通量筛选到选择性分析等一系列激酶研究解决方案。咨询订购热线：400-021-8158！

Cisbio 激酶检测，是基于抗体的检测产物生成的解决方案，其特异性各不相同。包括基于 ADP 定量的适用于所有激酶的 ADP Transcreener 检测试剂盒；利用通用底物的经过两百多种激酶验证的 KinEASE 试剂盒；利用特定底物、特异抗体的 HTRF 工具箱解决方案。

Cisbio激酶检测原理：

Cisbio 激酶检测，是基于抗体的检测产物生成的解决方案，其特异性各不相同。包括基于ADP定量的适用于所有激酶的 ADP Transcreener 检测试剂盒；利用通用底物的经过两百多种激酶验证的 KinEASE 试剂盒；利用特定底物、特异抗体的HTRF工具箱解决方案。关于HTRF技术的介绍请参阅

图1：HTRF磷酸化蛋白测量的实验过程

所有这些检测方案，操作步骤都是一致的。
（1）激酶反应：加入激酶、底物、ATP，室温进行激酶反应；
（2）检测步骤：激酶反应完毕，加入能量供体 Eu 和能量受体 XL665/d2 标记试剂，室温孵育1小时，读数。

激酶检测试验步骤：

所有的检测方案，操作步骤都是一致的。
（1）激酶反应：加入激酶、底物、ATP，室温进行激酶反应；
（2）检测步骤：激酶反应完毕，加入能量供体Eu和能量受体XL665/d2标记试剂，室温孵育1小时，读数。

KinEASE TK 试剂盒：

KinEASE TK试剂盒适用于所有酪氨酸激酶的检测。试剂盒提供生物素标记的底物、Eu标记的磷酸化位点特异性抗体、XL665标记的亲和素以及缓冲液。激酶将底物磷酸化，Eu-Ab识别磷酸化底物，XL665-SA与底物上的生物素结合。Eu与XL665接近，产生HTRF信号。

经过验证的激酶列表：

Ab1	ABL2	Arg	BIK	BInx	BRK	BTK	c-kit
CSF1R	CSK	C-SRC	DDR2	EGFR	EphA3	EphA4	EphA5
EphA8	EphB1	EphB2	EphB3	EphB4	ErbB4	FAK	Fer
Fes	FGFR1	FGFR2	FGFR3	FGFR4	Fgr	FIt1	FIt3
FIt4	Fms	Fps	FRK	Fyn	Hck	IGF-1R	INSRR
InsulinR	IRR	ITK	JAK2	JAK3	KDR	Kit	LCK
Lyn	Mer	Met	MAT1R	Musk	NTRK1	NTRK2	PDGFRβ
PYK2	PYK₂	PTK5	PTK6	Ret	Ron	Ros	Rse
Src	TEK	Tie2	TRKA	TRKB	TYRO3	VEGFR1	VEGFR2
VEGFR3	Yes	ZAP-70

咨询订购热线：400-021-8158！

产品订购信息：

产品名称	产品规格	产品货号
HTRF KinEASE-TK kit	1,000 tests	62TK0PEB
HTRF KinEASE-TK kit	20,000 tests	62TK0PEC
TK Substrate-biotin	50ug	61TK0BLE
TK Substrate-biotin	500ug	61TK0BLC

KinEASE STK 试剂盒：

KinEASE STK试剂盒是用来进行丝氨酸/苏氨酸激酶检测的试剂盒。根据激酶的不同，该试剂盒有三个通用底物可供选择，分别为S1、S2和S3，经过验证的激酶有一百多种。对于没有经过验证的激酶，可以用Discovery 试剂盒确定合适的底物，其中包括了三种底物。试剂盒的检测原理与实验步骤与KinEASE TK试剂盒相同。

经过验证的激酶列表：

HTRF KinEASE STK S1	AMPK	BrSKF2	CaMKI	CaMKIIa	CaMKIIβ	CaMKIIσ	CaMKIIγ	CaMKIV
	CHEK1	CHEK2	CHK1	CHK2	DAPK1	DAPK2	DAPK3	DCAMKL2
	DRAK1	LKB1	MAPKAP-K1α	MAPKAP-K1β	MAPKAP-K2	MAPKAP-K3	MAPKAPK5	MELK
	MLCK	Mnk2	PASK	PHK γ2	PKC α	PKC βI	PKC βII	PKC σ
	PKC ε	PKC γ	PKC ι	PKC μ	PKC τ	PKC ζ	PKD2	PRAK
	PRK2	PRKA	PRKD2	PRKG2	PRS6KA2	RsK1	RsK2	STK22B
	STK22D	ZIRK
HTRF KinEASE STK S2	Aurora A	Aurora B	MARK2	NEK11	PAK2	PAK3	PAK4	PAK5
	PAK6	PAR-1Bα	PKA	PKG1α	PKG1β	PRKACA	ROCK-I	ROCK-II
	ROKα	RPS6KA6	Rsk4	STK6	TBK1
HTRF KinEASE STK S3	AKT1	AKT2	AKT3	AKT5	ASK1	Aurora C	BRSK1	CDC42BPA
	CDC42BPB	Clk 3	COT	DMPK	DYRK2	GRK5	GRK6	GSK3α
	GSK3β	HIPK2	HIPK3	IKKα	IKKβ	LOK	MAP3K8	MARK1
	MINK	MINK1	MRCKα	MRCKβ	MSK1	MSK2	MSSK1	MST1
	MST2	NEK2	NEK3	NEK6	NEK7	NLK	P70S6K	Pim-1
	Pim-2	PKBα	PKBβ	PKBγ	PLK 3	RPS6KA4	RPS6KA5	RPS6KB1
	SAD1	SGK1	SGK2	SGK3	SGKL	SIK	Snk	STK23
	STK3	STK33	STK4	WNK2	WNK3

咨询订购热线：400-021-8158！

产品订购信息：

产品名称	产品规格	产品货号
HTRF KinEASE -STK S1 kit	1,000 tests	62ST1PEB
HTRF KinEASE -STK S1 kit	20,000 tests	62ST1PEC
HTRF KinEASE -STK S2 kit	1,000 tests	62ST2PEB
HTRF KinEASE -STK S2 kit	20,000 tests	62ST2PEC
HTRF KinEASE -STK S3 kit	1,000 tests	62ST3PEB
HTRF KinEASE -STK S3 kit	20,000 tests	62ST3PEC
HTRF KinEASE STK Discovery kit	1,000 tests	62ST0PEB
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STK-Substrate 2-biotin	500ug	61ST2BLC
STK-Substrate 3-biotin	50ug	61ST3BLE
STK-Substrate 3-biotin	500ug	61ST3BLC
Enzymatic buffer kinase 5X	10ml	62EZBFDC
Enzymatic buffer kinase 5X	50ml	62EZBFDD

HTRF 工具箱特定激酶解决方案：

如果您希望用特定的底物、特异的抗体进行激酶检测，HTRF工具箱试剂为您提供了多种选择。我们提供二十多种Eu标记的特异性抗体和与之配合使用的能量受体，包括XL665或者d2标记的链霉亲和素，抗6HIS抗体，抗GST抗体等。实验检测的是磷酸化产物的生成，实验信号跟底物磷酸化的程度成正比。

HTRF 工具箱方案实例

进行COT激酶的检测，其底物为MEK1，产物为磷酸化MEK1。我们选择Biotin-MEK1蛋白作底物,利用标记了Eu3+的抗磷酸化MEK1抗体和标记了XL665 ad 的链霉亲和素组成一个反应体系，如右图所示。该反应体系与KinEASE试剂盒是相似的，只是底物与Eu标记抗体是针对COT激酶的，比较特异。