Cisbio-HTRF筛选技术——高通量药物筛选必备神器
Cisbio成立于1974年,总部位于法国Codolet,专为生命科学和诊断市场开发、生产和销售高质量试剂和试剂盒。与市场上现有的传统分析方法相比,Cisbio所开发的方法能够为使用者提供更灵敏的定量免疫分析。其中包括各种经过验证的药物发现筛选试剂和高通量分析试剂盒,以及仅用于体外诊断试剂盒。 |
时间分辨荧光(TRF)
TRF利用稀土元素中镧系元素的独特性质,与普通荧光的主要区别是荧光的持续时间不同。普通荧光的半衰期为纳秒级,镧系元素的半衰期是毫秒级,有6个数量级的差别。所以,在检测时,TRF有一个时间延迟---50微秒。经过这个时间延迟,普通荧光的信号几乎为零。所以,TRF的背景非常低,反映样品的实际情况。
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荧光共振能量转移(FRET)
FRET技术利用了两种荧光基团的能量转移,这两种荧光基团分别称为能量供体(Donor)和能量受体(Acceptor)。Donor 被外来光源激发(例如氙灯或激光),如果它与Acceptor 比较接近,可以将能量共振转移到Acceptor上,使其受到激发,发出特定波长的发射光。将 Donor 和 Acceptor分别与相互作用的两个生物分子结合,生物分子的结合可以将 Donor 和 Acceptor 拉到足够近的距离,产生能量转移。由于Acceptor的发射光来自于能量转移,所以在实验中不需要将未结合与已结合的分子分开,即不需要洗涤步骤。
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· 操作非常简单:空板直接加样,加完即可检测,时间短(加样和孵育2h)
· 体系非常稳定:7天内可随时检测,信号基本不变
· 适合珍贵样本:整个实验体系只需20ul
· 均相检测体系:无需包被,免洗ELISA,省时省力
· 数据客观真实:比值处理可有效去除背景荧光,假阳性率和假阴性率低
· 反映样品的实际情况,假阳性假阴性率低,可去除由于天热产物自发荧光引起的背景
HTRF的能量供体是铕(Eu)和铽(Tb)的穴状化合物。
在这个穴状化合物里,Eu和Tb被永久地嵌合在一个笼子里,结构非常稳定。
这个结构是由J. M. Lehn's教授发明的,并由此在1987年获得了诺贝尔奖。
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穴位化合物结构图 |
试剂盒 |
应用 |
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激酶(Kinase) |
STK |
1、丝氨酸、苏氨酸激酶活性检测 |
TK |
1、酪氨酸激酶活性检测 |
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ADP Transcreener |
激酶、ATP酶活性检测,以及反应中生成ADP的定量 |
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G蛋白偶联受体 |
cAMP |
1、Gs,Gi类受体激动剂和拮抗剂的筛选 |
IP-One |
1、Gq类受体活性检测 |
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IP-One Elisa |
针对科研用户推出的传统的Elisa方法 |
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Tag-lite |
1、替代同位素做受体配体结合试验2、受体的二聚化试验 |
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磷酸化蛋白 |
pERK |
1、AKT/MAPK通路研究 |
pAKT |
1、AKT/MAPK通路研究 |
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生物标记物 |
Amyloid beta1-40 |
1、Amyloid beta1-40 peptide定量 |
Apo A1 |
1、载脂蛋白A1定量 |
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Apo B |
1、载脂蛋白B定量 |
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cGMP |
1、cGMP定量 |
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Cortisol |
1、Cortisol定量 |
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Estradiol |
l、Estradiol定量 |
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Histamine |
Histamine定量 |
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Insulin |
Insulin定量 |
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PEG2 |
PGE2定量 |
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Sirt1 |
Sirt1酶活性检测 |
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抗体定量 |
Total IgG |
1、IgG定量 |
Kappa Mab |
1、含Kappa轻链抗体的定量 |
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Lamda Mab |
1、含Lamda轻链抗体的定量 |
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