DNAstable(R) and DNAstable(R) LD 操作手册 - 西宝生物翻译整理
DNAstable怎么用?西宝生物翻译整理了DNAstable 和DNAstable LD的操作手册供大家参考。
Biomatrica是一家生物稳定技术美国高科技公司。公司位于美国加利福尼亚州的美丽海滨城市圣地亚哥。Biomatrica产品DNAgard Saliva, RNAstable, DNAstable, CloneStab, RNAgard, DNAgard 使研究人员,在例如药物开发和分子诊断领域,以非常低廉的成本稳定运输和储存完整的生物样品,并在短时间内恢复样本活性。其Samplematrix®专有核心技术能够在室温下稳定和保护生物材料。现在用一个信封就可邮寄过去需要大量干冰才能办得到的事。此外,该技术也使在室温下进行许多生物实验变成了现实。
上海西宝生物提供进口系列生物样品在室温(15-28℃)保存的稳定剂DNAstable,可保存生物样品可长达30年之久。
DNAstable® and DNAstable® LD操作手册
1、样品制备
---适用于已纯化的DNA,各形式的DNA均可在DNAstable保护下长期储存,包括基因组DNA、质粒、寡核苷酸、PCR产物、人工染色体和复杂样品混合DNA(例如法医取证DNA和基因鉴定DNA样品)。
- 绝大多数标准分子生物学技术市售试剂盒与DNAstable是完全兼容的;为得到较佳效果,DNA样品必须是已经纯化过的,无污染、不含活性DNA酶;
- 在加入到 DNAstable(干式or管式)之前,纯化DNA应悬浮在水或者TE缓冲液(10nM Tris.Cl,1mM EDTA);
- 加入之前,同样应该确定DNA样品浓度;虽然没有必要,但是任然建议确立一个公式,以便以后的检索和应用;
- 为得到较佳效果,每管(孔)DNA质量不应超过30ug,and 不超过50ul。针对寡核苷酸,我们建议每管(孔)20ul保存,浓度≤100μM per oligo(2nmol of each oligo)。
2、样品干燥和保存
--DNAstable 可以再室温下保护DNA活性。每个PE管或板孔都含有DNAstable(固定在底部,粉红色),可以保护皮克和微克级的DNA。DNAstable 是针对液体样本的应用,基质溶解并在包围样品表面形成保护层。then 样品需要完全干燥以便于在室温状态长期保护其活性稳定。
注意:如果后期要使用分光光度计来测量样品浓度,建议保留一个未使用的的DNAstable 管或者板孔 作为空白对照。
流程:
- a、确定样品种DNA数量(μg/ml),并计算出应加入到PE管或者板孔的体积;
- b、直接加入液体样品到PE管或者板孔;
- c、混匀,避免气泡产生
- d、室温(15-25℃)干燥
- e、室温储存干燥的样品、注意防潮。
建议最终体积不要超过50ul;大体积样品需要真空干燥以保证完全干燥,我们建议使用自然干燥(层流工作台)和真空离心干燥,所需时间见下面图片表格。
注意:干燥需要在室温下进行,长时间处于潮湿环境会降低产品性能和保护效果。实验室环境通常保持40-50%的相对湿度,如果超过了这一标准,我们建议您使用真空干燥装置。
完全干燥后的样品,需要用铝箔袋密封。PE管式的产品,盖子如果没有受损,也可以保证密封效果。
DNAstable对温度和湿度敏感,因此建议保存在室温干燥环境中,长期的暴露在光照环境可能会导致产品变色,但是不影响保护效果。避光可以防止产品变色。
液体DNAstable(DNAstable LD)使用说明
将20ulDNAstable LD加入到1-100ul DNA样品的水溶液或者缓冲液中(≤30μg).上下颠倒PE管,以混匀,尽量避免产生气泡。干燥过程见上述。
3、样品复苏
流程:
- a、加入10-100ul体积的水或者缓冲液到干燥的样品管或者板孔中; 水和缓冲液的种类、体积,根据之前计算出来的DNA质量,和具体的下游应用来计算和选择;
- b、室温存放15min以便完全溶解;
- c、上下颠倒PE管,混匀样品,避免气泡;
- d、未使用的溶解后样品可以在4℃存放,或者室温存放10天。
未使用样品可以再次干燥并长期存放,不影响样品稳定性,但是建议溶解并重复干燥次数不要超过3次。
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