LabAssay(TM) ALP LabAssay(TM) 碱性磷酸酶检测试剂盒
LabAssay™ ALP LabAssay™ 碱性磷酸酶检测试剂盒
碱性磷酸酶的活性检测试剂盒，常用于检测培养的成骨细胞、实验动物血清和骨组织中的碱性磷酸酶活性。 碱性磷酸酶（ALP）广泛分布于肝脏、骨和小肠之中。组织中酶活性的变化是成骨等生理现象的重要标志。在骨代谢研究领域被用作骨形成指标之一。
本产品是以对硝基苯磷酸盐为底物的碱性磷酸酶检测试剂盒，通过使用酶标仪进行多样品检测。
◆检测原理
碱性磷酸酶存在下，碳酸盐缓冲溶液（pH 9.8）中的对硝基苯磷酸盐分解成对硝基苯酚和磷酸，产生的对硝基苯酚在碱性条件下呈黄色。通过测量405 nm处的吸光度，可以计算样品中的碱性磷酸酶活性。
◆试剂盒性能
检测范围：>0.06 mmol/L
标准曲线范围：0.0625~0.5 mmol/L
重复性：C.V.<10%
样品：血清（小鼠、大鼠、人）
所需样品量：20 μL
检测时间：约20min
检测波长：405 nm
◆试剂盒组成
| 底物片（溶解时对硝基苯基磷酸二钠 6.7 mmol/L) | 10 片 |
| 底物溶解buffer （2.0 mmol/L 氯化镁 含有 0.1 mol/L 碳酸盐缓冲液 pH 9.8) | 50 mL × 1瓶 |
| 反应终止液（0.2 mol/L氢氧化钠溶液） | 50 mL × 1瓶 |
| 标准溶液 (0.5 mmol/L 对硝基苯酚溶液） | 5 mL × 1瓶 |
◆标准曲线示例
◆检测操作方法
根据下表中的条件进行反应。
|
Test
|
标准
|
空白
|
|
|
底物缓冲液
|
100 μL
|
100 μL
|
100 μL
|
|
待测物
|
样品20 μL
|
标准溶液20 μL
|
蒸馏水 20 μL
|
|
孔板混匀仪中震荡1 min，37°C下孵育15 min。
|
|||
|
反应终止液
|
80 μL
|
80 μL
|
80 μL
|
|
孔板混匀仪中震荡1 min，使用酶标仪测量405 nm处吸光度
|
|||
◆数据
加标回收测试
ALP的加标回收测试，将已知含量的标准品加标到人、小鼠、大鼠样品中，n=2。
人血清样品
|
添加量(mmol/L)
|
平均值(mmol/L)
|
回收量(mmol/L)
|
回收率（%）
|
|
－
|
0.429
|
－
|
－
|
|
0.097
|
0.527
|
0.098
|
101
|
|
0.197
|
0.587
|
0.158
|
80.2
|
|
0.297
|
0.672
|
0.243
|
81.8
|
|
0.507
|
0.866
|
0.437
|
86.2
|
小鼠血清样品
|
添加量(mmol/L)
|
平均值(mmol/L)
|
回收量(mmol/L)
|
回收率（%）
|
|
－
|
0.284
|
－
|
－
|
|
0.060
|
0.343
|
0.059
|
98.3
|
|
0.127
|
0.399
|
0.115
|
90.6
|
|
0.251
|
0.507
|
0.223
|
88.8
|
|
0.500
|
0.753
|
0.469
|
93.8
|
大鼠血清样品
|
添加量(mmol/L)
|
平均值(mmol/L)
|
回收量(mmol/L)
|
回收率（%）
|
|
－
|
0.374
|
－
|
－
|
|
0.060
|
0.439
|
0.065
|
108.3
|
|
0.127
|
0.483
|
0.109
|
85.8
|
|
0.251
|
0.598
|
0.224
|
89.2
|
|
0.500
|
0.855
|
0.481
|
96.2
|
◆稀释线性度测试
使用随附的缓冲液制备样品，使其处于检测范围内，用缓冲液连续梯度稀释4次，并检测结果。
● 人血清样品
● 小鼠血清样品
● 大鼠血清样品
样品检测示例
● 人样品
|
样品
|
检测值 (mean)
|
SD
|
CV (%)
|
|
混合血清，男性
|
0.556
|
0.003
|
0.5
|
|
混合血浆(EDTA)，男性
|
0.07
|
0.001
|
1.2
|
※抗凝固剂的EDTA会产生负误差，所以请不要使用。
● 小鼠样品：CD-1(ICR)、雄性、血清
|
样品
|
检测值 (mean)
|
SD
|
CV (%)
|
|
No.1
|
0.31
|
0.013
|
4.2
|
|
No.2
|
0.453
|
0.001
|
0.2
|
|
No.3
|
0.495
|
0.015
|
3
|
|
No.4
|
0.442
|
0.013
|
2.9
|
|
No.5
|
0.373
|
0.002
|
0.5
|
● 大鼠样品：SD、雄性、血清
|
样品
|
检测值(mean)
|
SD
|
CV (%)
|
|
No.1
|
0.538
|
0.005
|
1
|
|
No.2
|
0.441
|
0.01
|
2.2
|
|
No.3
|
0.357
|
0
|
0
|
|
No.4
|
0.46
|
0.002
|
0.5
|
|
No.5
|
0.301
|
0.011
|
3.6
|
单位：mmol/L, n=2
产品列表
| 产品编号 | 产品名称 | 规格 | 产品等级 |
|
633-51021
|
LabAssay™ ALP
LabAssay™ 碱性磷酸酶检测试剂盒
|
500 tests
|
for Cellbiology
|
※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。
 |
 |
 |
| 官网：www.cxbio.com | 微信服务号：iseebio | 微博：seebiobiotech |
 |
 |
 |
| 商城：mall.seebio.cn | 微信订阅号：seebiotech | 泉养堂：www.canmedo.com |
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