Seebio(R) Reverse Transcriptase逆转录酶

来源：作者：人气：-发表时间：2021-12-27 09:34:00【大中小】

“逆转录”是指，在生物学中以RNA为模板合成DNA的过程，即RNA指导下的DNA合成。此过程中，核酸合成与转录（DNA到RNA）过程与遗传信息的流动方向（RNA到DNA）相反，故称为逆转录。逆转录过程是RNA病毒的复制形式之一，在逆转录的过程中需要逆转录酶的催化。故而逆转录酶在RNA逆转录的过程中起着不可或缺的作用。

简要过程如下：

逆转录酶的作用是以dNTP为底物，以RNA为模板，tRNA(主要是色氨酸tRNA)为引物，在tRNA3'-末端上，按5'→3'方向，合成一条与RNA模板互补的cDNA单链，它与RNA模板形成RNA-cDNA杂交体。随后又在反转录酶的作用下，水解掉RNA链，再以cDNA为模板合成第二条DNA链。至此，完成由RNA指导的DNA合成过程。

应用背景：

逆转录在分子生物领域已有很广泛的应用，比如逆转录，主要是提取组织或细胞中的总RNA，以RNA为模板，利用逆转录酶反转录成cDNA，再以cDNA链为模板进行PCR扩增，从而获得大量拷贝。逆转录PCR的出现使RNA检测的灵敏性提高了几个数量级，使一些极为微量RNA样品分析成为可能。这在体外诊断领域大大提高了疾病的检测诊断效率。

临床应用：

逆转录PCR可用于分析基因的转录产物、检测细胞中RNA病毒的含量、合成cDNA探针、直接克隆特定基因的cDNA序列等。如在临床上RT-PCR可以用于遗传病诊断、癌症检测、检测病人标本中的RNA病毒，如HAV、HCR、HIV等。

西宝生物致力于开发高品质的体外诊断原材料，潜心研发，专注品质，我们开发出了一种新型逆转录酶，Seebio®Reverse Transcriptase”是Seebio®逆转录酶家族中一个全新的成员，详情可咨询400-021-8148！

截止目前市场上逆转录酶数不胜数，很多逆转录酶能够在基本性能上满足科学家在研发过程中的使用比如（扩增长度、灵敏度、可重复性、产量），但当存在抑制剂、RNA被降解、样本制备困难的时候、实际使用就会低于预期效果，这时Seebio®Reverse Transcriptase逆转录酶就表现出了非同一般的效果。西宝生物系列逆转录产品，与市面上其他逆转录产品相比，拥有更高的逆转录反应温度，cDNA产量更高，具有更完整的基因代表性。

产品概述

Seebio®逆转录酶是一种大肠杆菌重组表达的鼠白血病逆转录酶，是一款全新的高效逆转录酶，可进行高效率的逆转录反应。对于复杂二级结构的RNA，可将逆转录温度提高至50~55℃，避免RNA复杂二级结构对cDNA合成的抑制，可有效合成高质量的cDNA。除此之外，本产品具有优越的持续合成能力和强的杂质耐受度。可提供更高的全长cDNA产量，具有更完整的基因表现性。产品咨询：400-021-8158！

产品优势

1)逆转录效率高、产量优异：缺失了RNA酶H活性，具有更强的延伸能力和稳定性，具有卓越的逆转录效率，可提供较普通逆转录酶更高的全长cDNA产量；
2)耐热性及稳定性强：逆转录酶耐受高温的能力是cDNA合成的重要影响因素，Seebio逆转录酶在50-55℃下具有更高的热稳定性和更长的半衰期；
3)适用性广兼容性好：可兼容动物、植物、病毒等多种模板；
4)杂质耐受度强：对于常见杂质（乙醇、异丙醇、水平衡酚、异硫氰酸胍、腐殖酸）均具有强的耐受度。

产品组分

产品	组分	产品编号	订购规格
Seebio® Reverse Transcriptase	Seebio® Reverse Transcriptase（200U/μl） Seebio® dNTP Mixture 5× RT Buffer RNase-free ddH2O	DAA0309B	2KU 10KU 4*10KU

保存条件

-30~-15℃储存。于-20~0℃运输。

单位定义

以Poly (rA)·Oligo (dT)为模板/引物，在37℃，10 min条件下，掺入1 nmol的dTTP为酸不溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位 (U)。

产品应用

总RNA或者mRNA合成cDNA第一链，合成的cDNA第一条链后续可以用于PCR、real-time PCR、cDNA第二条链的合成等。

注意事项

防止RNase污染：请保持实验区域洁净；操作时需穿戴干净的手套、口罩；实验所用的离心管、枪头等耗材均需保证RNase-free。

功能检测

逆转录体系中加入200U本酶，以1pg 293细胞总RNA为模板，Oligo(dT)20为引物，42℃反应15min。取1/10 cDNA产物进行PCR扩增GAPDH基因。琼脂糖凝胶电泳，可见有单一的550bp条带。

耐热检测

温度对普通逆转录具有显著影响，反应温度由42℃升至52℃，MMLV-RTs效果明显变差，C(t) 值由18升至25，但对于Seebio-RTs的影响不显著， C(t)值未发生显著改变。

西宝生物可提供各种分子诊断酶产品，均可定制大包装，详情咨询西宝生物400-021-8158！或者联系我司诊断团队。

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