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Seebio(R) 两款硫酸葡聚糖钠盐 - 消除细胞聚团就是这么简单

来源：作者：人气：-发表时间：2023-11-07 08:47:00【大中小】

细胞结团的原因

悬浮细胞可能由于各种原因相互附着并发生结团。细胞结团常见的原因是在细胞裂解之后，培养基中存在游离DNA和细胞碎片，DNA的粘性使细胞和其他碎片聚集成大的团块。

工艺培养过程中分析细胞结团的原因来自两方面：

1 动物细胞本身可能存在固有的细胞结团现象，如CHOS细胞；

2 动物细胞在遇到不良的营养条件和环境，也容易发生细胞聚集现象，以及培养基中Ca2+等离子的浓度也会影响细胞黏附。

聚团后的影响

细胞微环境会发生恶化如：

氧气供应不足
代谢废物积累
营养物不足等
细胞死亡

如何抗细胞结团？

抗细胞结团常采用的物质是多硫酸化合物，例如：肝素钠、硫酸乙酰肝素、苏拉明和硫酸葡聚糖。在多种多硫酸盐化合物中，硫酸葡聚糖是在CHO细胞悬浮培养中应用广泛的抗结团剂。

硫酸葡聚糖抗细胞结团原理

葡聚糖硫酸钠（Dextran sulfate sodium salt，DSS）是葡聚糖的聚阴离子衍生物，由葡聚糖和氯磺酸的酯化反应形成，以钠盐形式提供，并通过添加少量磷酸盐进行稳定。

不同分子量和浓度的硫酸葡聚糖的影响

2016年，科学家研究了硫酸葡聚糖的三种不同分子量（4000Da、15000Da和40000Da，其对应的S比例分别为3-6%、17-19%和15-19%），以及不同浓度（0.1-1.0g/L）对两种不同重组CHO细胞（CHO-K1细胞和DG44细胞）的生长和单克隆抗体产量影响。并同时评估添加硫酸葡聚糖对单抗的关键质量属性（如聚体、电荷变化和N-糖基化等)的影响。

前期研究发现，采用200000Da的硫酸葡聚糖，无论使用哪种浓度（0.1-1.0g/L），都会使活细胞密度和抗体浓度降低20-30％。说明采用200000Da的硫酸葡聚糖对细胞来说是有害。添加上述不同分子量不同浓度的硫酸葡聚糖对于CHOK1细胞，可以显著维持培养后期细胞密度和活力，需要注意的是抗体表达并未对应提高。

而对于DG44细胞添加硫酸葡聚糖，尤其是40,000Da分子量对于DG44细胞，细胞聚集会大大降低。并且显著提高了抗体产物浓度。

另外通过硫酸葡聚糖对抗体质量属性的影响研究表明对于DG44细胞添加4000Da和15000 Da硫酸葡聚糖对单克隆抗体的电荷异构体无影响(P<0.05)，只有添加40,000Da硫酸葡聚糖才显著降低碱性电荷异构体(P<0.05)；

添加硫酸葡聚糖对单克隆抗体的质量属性(聚体、电荷异构体和N -糖基化)没有负面影响，甚至可以对部分质量属性产生积极影响，如影响单克隆抗体的电荷异构体，降低碱峰。

总之，对于细胞生长、抗体产量和质量的影响取决于硫酸葡聚糖的分子量、浓度和CHO细胞系的选择。因此，针对不同CHO细胞系，建议优化硫酸葡聚糖的分子量和浓度，以发挥硫酸葡聚糖在单克隆抗体生产中的有益作用。

目前也有很多用硫酸葡聚糖钠盐,Mw 5,000 ，平均分子量约5 kD，可通过改变细胞表面的电荷，来促使单个细胞悬浮，防止细胞结团，支持细胞高密度培养，提高细胞活力。

Seebio®提供两款高品质细胞抗结团用硫酸葡聚糖钠Mw5000，Mw40000

产品特点

1、 质量优良：纯度高，含硫量15~20%；

2、 稳定性高：聚阴离子复合物，可溶于水，形成无色溶液，形似天然粘多糖；

3、 内毒素低：低于5EU/g，对细胞伤害较小。

3、 性能突出: 能有效降低CHO、T细胞培养结团。

产品指标

总硫含量	15~20%
硫酸根含量	≤0.2%
热失重（105℃，2h）	≤10.0%
pH	5.0~7.5
旋光度	+75°~ +105°
铁离子	≤2.0%
氯离子含量	≤1000ppm
外观	白色~淡黄色粉末
微生物限度	需氧菌＜10⁵ cfu/g
霉菌、酵母菌总数	＜100 cfu/g
内毒素	＜5EU/g

订购信息

货号	产品名称
DCJ0018C	Seebio® 硫酸葡聚糖钠盐 5,000（DSS）
DCJ0018D	Seebio® 硫酸葡聚糖钠盐 5,000（DSS），低内毒素
DCJ1606D	Seebio® 硫酸葡聚糖钠盐 40,000（DSS），低内毒素

Seebio葡聚糖硫酸钠系列产品

各类不同用途葡聚糖硫酸钠（DSS）

葡聚糖硫酸钠	肠炎模型	分子生物学	抗病毒	抗凝血剂	抗血脂剂	化妆品研发
6000-8000			√	√		√
8000（平均）			√	√		√
36000-50000	√		√		√
400000-600000		√	√		√
1400000（平均）		√	√

产品信息

货号	产品名称
ACJ172A	硫酸葡聚糖钠 2000（DSS）
DCJ0083A	硫酸葡聚糖钠 3000（DSS）
DCJ0018C	Seebio® 硫酸葡聚糖钠盐 5,000（DSS）
DCJ0018D	Seebio® 硫酸葡聚糖钠盐 5,000（DSS），低内毒素
ACJ1516E	硫酸葡聚糖钠 15000（DSS）
DCJ1606A	硫酸葡聚糖钠 40,000（DSS）
DCJ1606D	Seebio® 硫酸葡聚糖钠盐 40,000（DSS），低内毒素
DCJ0105A	硫酸葡聚糖钠 36,000~50,000（DSS）
DCJ0016A	硫酸葡聚糖钠 500,000（DSS）