蛋白质结构序列分析用V8蛋白酶 * 蛋白内切酶Glu-C

来源：作者：人气：-发表时间：2020-03-10 13:31:00【大中小】

◆ 产品介绍

酶切位点：V8蛋白酶属于丝氨酸蛋白酶家族，能特异水解谷氨酸（Glutamic acid、E）或天冬氨酸（Aspartic acid、D）残基羧基侧肽键。在pH 7.8的NH4HCO3和pH 4.0的CH3COONH4缓冲液中识别并切割Glu羧基端肽键，在pH 7.8的磷酸盐缓冲液中识别并切割Glu或Asp羧基端肽键，且对Glu的水解速率高于Asp。

别名：Endoproteinase Glu C，Staphylococcal Protease Protease V8，蛋白内切酶 Glu-C
CAS NO：66676-43-5
EC NO：3.4.21.19
分子量：约27000
外观：白色的结晶或结晶性粉末

在温和条件下进行蛋白多肽链的切断，不会引起氨基酸残基侧链的修饰（氧化、卤化、脱酰胺等）。而且，被修饰残基（糖链、类脂体、磷酸、硫酸等的结合部位）的肽一般以完整形态被回收，而且具有良好的回收率。如果采用同样的消化条件可以实现高再现性的分段。使用底物特异性高的酶进行蛋白质的结构分析，可预测氨基酸组成的大体片段数和平均大小，并且重要的是可以避免由于部分切断（非特异性切断），导致分离的复杂化。

◆ 产品应用

本品由Drapeau系列的Staphylococcus aureus（V8菌株）分离而成，是特异性切断谷酰胺产的羧基侧链的酶。分别切断磷酸系列缓冲液中包含谷氨酸及天冬氨酸羧基侧链、氨系列缓冲液中包含谷氨酸羧基侧链的肽结合酯结合。因为其高底物特异性，本品被用于各种蛋白质结构序列分析时使用。在进行蛋白质酶切测序、肽图谱分析和肽质量指纹图谱分析中使用时，可以单独使用或与其他蛋白酶混合使用。

◆ 特异性

切断氨缓冲液中包含谷氨酸羧基侧链的肽结合和酯结合。切断磷酸缓冲液中包含谷氨酸及天冬氨酸羧基侧链的肽结合和酯结合。

活性：20units/mg以上

单位的定义：以2-Phe-Leu-Glu-4-NA为底物，在pH7.8,25℃情况下，1分钟生产1μmol 4-硝基苯胺所需酶的量为1unit。

反应：特异性切断谷氨酸的羧基侧链。

◆ 使用方法

仅切断谷氨酸羧基

在0.01~0.1mol/L碳酸氢铵（pH7.8）或者在0.01~0.1mol/L醋酸铵（pH4.0）中，酵素：底物（mol/mol）=1：30~100，在30~37℃情况下，分解2~24小时。

同时切断天冬氨酸羧基

在0.01~0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.8）中，以同样条件分解。

用途：各种蛋白质的序列分析的肽分段。

较佳pH：在pH3.5~9.5范围有蛋白酶活性。pH4.0及pH7.8时，活性极大（以血红蛋白为底物）。

抑制情况：主要抑制剂：DFP

◆ 注意事项

稳定性: pH值为4~10时，物质稳定。冷冻干燥或冷冻，保存时间较长。在0.2%的SDS中，具有100%活性：在4mol/L尿素中，具有50%活性。

◆ 产品列表

产品编号	产品名称	产品规格	储存条件
164-13982	V8 Protease V8蛋白酶	2mg	2-10℃
050-05941	Endoproteinase Glu-C, Sequencing Grade 测序级谷氨酰蛋白内切酶Glu-C	50ug	2-10℃
056-05921	Endoproteinase Asp-N, Sequencing Grade 测序级天冬氨酰蛋白内切酶Asp-N	2ug	2-10℃

作为一家综合性的服务商，西宝生物还可提供重组Glu-C蛋白酶

序列分析纯胰蛋白酶：特异性高，稳定性好。
无动物源性：重组生产，无外源性的病毒污染，生产过程不使用任何动物源原料。
质量稳定：批量生产，可保证稳定连续的批次生产；产品批次间无差异，质量稳定。
纯度高：比活高；宿主蛋白残留小于生物制品限度要求。
冻干粉：易于储存和运输。

◆ 重组V8蛋白酶产品应用

1.对于分析赖氨酸和精氨酸含量高的蛋白质，与胰蛋白酶联用可显著提高鉴定蛋白数目

2.适用于分离和富集磷酸化肽段

◆ 重组V8蛋白酶产品列表

产品编号	产品名称	产品规格	储存条件
AXJ4266D-20ug	Recombinant Glu-C Protease (activity＞7U/mg) 重组Glu-C蛋白酶（活性＞7U/mg）	2mg	短期2-8℃，长期-20℃
AXJ4266D-100ug		100ug
AXJ4266C-20ug	Recombinant Glu-C Protease,lyophilized (activity＞7U/mg) 重组Glu-C蛋白酶，冻干（活性＞7U/mg）	20ug
AXJ4266C-100ug		100ug