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本规程适用于白喉、破伤风、气性坏疽及肉毒四种精制抗毒素。
精制白喉、破伤风、气性坏疽、肉毒抗毒素系分别由各该抗毒素的马血浆经胃酶消化后用硫酸铵盐析法制得的液体或冻干抗毒素球蛋白制剂。分别用于各该疾病的预防和治疗。
1 制造
1.1对血浆的要求
1.1.1制造精制抗毒素的血浆,应符合附录1《抗毒素生产用马匹免疫方法》的规定。在保存期间如发一周明显的溶血、染菌及其他异常现象,不得投入生产。
1.1.2血浆的抗毒素效价不得低于下列[查看]
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发酵已经从过去简单的生产酒精类饮料、生产醋酸和发酵面包已经发展天成为生物工程的一个重要的分支,成为一个包括了微生物学、化学工程、基因工程、细胞工程、机械工程和计算机软硬件工程的一个多学科工程。从广义上讲,发酵工程由三部分组成:是游工程,发酵工程和下游工程。其中,下游工程指从发酵液中分离和纯化产品的技术:包括固液分离技术(离心分离,过滤分离,沉淀分离等工艺),细胞破壁技术(超声、高压剪切、渗透压、表面活性剂和溶壁酶等),蛋白质纯化技术(沉淀法、色谱分离法和超滤法等)[查看]
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一、目的和要求
1、 了解固定化酶及微生物细胞固定化的原理及其优缺点。
2、 掌握固定化细胞中基本、常用的方法。
3、 学会利用固定化酿酒酵母细胞进行酒精发酵。
二、原理
人们利用微生物进行发酵生产的主要目的在于利用微生物的固有酶系进行各种相关的酶促反应。当考虑到微生物细胞可将各种酶再生,并且酶在细胞内比提取出来后的稳定性更高的特点,科学家们开始了从酶的固定化研究进入了微生物细胞固定化的研究历程。
固定化酶和固定化细胞的原理是将酶或微生物细胞利用物理、化学方法,将酶或[查看]
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动物细胞培养技术
最早的生物制品是采用传统的生物化学技术从动物组织获取的,如生物提取的生长激素、干扰素、疫苗及白细胞介素等。随着社会经济的发展,人类对生物制品的需求激增,传统提取的生物制品产量和质量已远远不能满足需求,于是通过大规模培养动物细胞生产生物制品便被提到议事日程上来。第一代细胞培养技术核心问题是难以产业化或者说是规模化生产,体现在工艺生产时不能大规模制备产品;非批量生产容易导致产品质量的不均一性;难以对同批产品进行生产和质量控制。随后,利用199、MEM等合成培养基[查看]
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基因工程在工业上的应用
微生物发酵生产法具有许多优越性,结合基因工程手段,可实现许多美好的设想。例如,目前用100 kg胰脏只能提取3~4 g胰岛素,而用“工程菌”进行发酵生产,则只要用几升发酵液就可取得同样数量的产品。1978年美国有两个实验室合作,使大肠杆菌产生大白鼠胰岛素的研究已获成功。接着,又报道了通过基因工程使大肠杆菌合成人胰岛素实验成功的消息。1982年,我国科学工作者也利用遗传工程技术,将人工合成的脑啡肽基因移植到大肠杆菌中,[查看]
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所谓细胞工程,是指以细胞为基本单位进行培养、增殖或按照人们的意愿改造细胞的某些生物学特性,从而创造新的生物和物种,以获得具有经济价值的生物产品。它主要由两部分构成,其一是上游工程,包含细胞培养、细胞遗传操作和细胞保藏三个步骤。另一个则是下游工程,是将已转化的细胞应用到生产实践中去,以生产生物产品的过程。顾名思义,植物细胞工程,当然就是针对植物细胞的细胞工程了,它是细胞工程的一个重要组成部分。
自1904年Hanning成功培养离体胚以来,[查看]
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1 科学研究:药物研究开发与基础研究
药物研究与开发
(1) 新药筛选:如化学合成药物药效研究,中药有效成分筛选与鉴定等.
(2) 疫苗研究与开发:如病毒性疫苗的研究与开发(肝炎病毒疫苗,艾滋病疫苗等),肿瘤疫苗(多肽疫苗)等.
(3) 基因工程药物研究与开发:如干扰素研究与开发,细胞生长因子研究与开发等.
(4) 细胞工程药物研究与开发:生物活性多肽研究与开发,人参皂甙,紫杉醇等生物活性成分研究与开发.
(5) 单克隆抗体制备:包括诊断用单克隆抗体,治疗用单克隆抗体.
基础研究
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细胞培养的一般过程
一、准备工作
准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,推备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试,具体内容可参阅有关文献。
二、取材
在无菌环境下从机体取出某种组织细胞(视实验目的而定),经过一定的处理(如消化分散细胞、分[查看]
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1 冷冻管应如何解冻?
取出冷冻管后, 须立即放入37 °C 水槽中快速解冻, 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化, 并注意水面不可超过冷冻管盖沿, 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时, 必须注意安全, 预防冷冻管之爆裂。
2 细胞冷冻管解冻培养时, 是否应马上去除DMSO?
除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外, 绝大部分细胞株(包括悬浮性细胞), 在解冻之后, 应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中, 待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可, 如此可避免大[查看]
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培养细胞的完全培养基由基础培养基(如MEM)和添加剂(如血清或无血清培养用的某些确定的激素及生长因子)组成,培养基的配方一直在改进,其中包括抗生素和抗有丝分裂剂等等。
一、基础培养基
绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12[查看]
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实用哺乳动物细胞培养手册
细胞培养基本概念
细胞培养是指从体内组织取出细胞在体外模拟体内环境下,使其生长繁殖,并维持其结构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物可以是单个细胞,也可以是细胞群。
细胞培养目的与用途
1、科学研究:药物研究开发与基础研究
药物研究与开发
(1) 新药筛选:如化学合成药物药效研究、中药有效成分筛选与鉴定等。
(2) 疫苗研究与开发:如病毒性疫苗的研究与开发(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等)、肿瘤疫苗(多肽疫苗)等。
(3) 基因工程药物研究与开发:如干扰素研究与开[查看]
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PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内,有些应于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。
一.假阴性,不出现扩增条带
PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及活性 ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。
模板:①模板中含有杂蛋白质,②模板中含有Taq酶抑制剂,③模板中蛋白质没有消化除净,特别是染色体中的组蛋白,[查看]
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