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基因高效表达试剂盒——西宝生物助科研“快”人一等

来源:作者:人气:-发表时间:2015-10-10 13:49:00【

原核表达系统的研究在近年来如火如荼,Medline报道了大量使用原核表达获得有活性的可溶蛋白。2002年,瑞典科学家Torleif在美国冷泉港实验室出版的《Protein Science》(2002,11:313-321)上发表的《Rapid screening for improved solubility of small human proteins produced as fusion proteins in Escherichia coli》一文揭开了原核高效快速组合筛选表达系统用于蛋白组学研究的序幕。

 

西宝生物隆重推出的原核基因高效快速表达试剂盒,是将九种表达载体包括分泌型、引导分泌型、胞内直接表达型、分子内伴侣协助折叠型、高度稳定伴侣型等系统的多克隆位点统一,同时统一诱导表达剂和培养基,一次可以同时克隆九种载体进行表达筛选,极大地节省宝贵的科研时间。
 
一、产品优势及特点
西宝生物基因高效快速表达试剂盒采用多系统多载体同时筛选快速表达的策略,像美国Amgen、Gentech、Incyte 等生物技术公司同样采用这一策略。这一策略的优势就是快速且成功率高。本系统适合高通量快速筛选大量未知基因,对基因组学和蛋白组学的研究是一个不可缺少的工具。
  1. 提供详实的操作说明和丰富的参考文献。
  2. 下游多种亲和层析组合方便您快速纯化目的蛋白。
  3. 分子内伴侣和分泌表达能极大限度避免包涵体形成,直接获得有活性可溶蛋白,这一点对于未知基因功能的研究很重要。
  4. 九套高效表达载体同时克隆筛选,极大地节省您宝贵的科研时间。
  5. T7 溶菌酶和lacIq阻遏蛋白能起到严格控制诱导前表达的作用,同时强启动子、高拷贝复制子等方法结合可获得高达50%的表达量。
  6. 已有400多个基因通过该试剂盒而表达成功。

 

二、产品技术路线
 
三、产品组成:
由于大肠杆菌表达系统遗传背景清楚、易于大规模发酵等优点,尤其是近年来采用分子内伴侣的技术(如Trx、DsbA 等)使得许多外源基因能在E.coli 里正确折叠,如IL—11、GM—CSF、INF、 Insulin甚至包括结构复杂的tPA 等均可获得正确折叠的重组可溶性活性蛋白,使得E.coli 高效快速表达系统仍然是分子生物学实验室一个不可缺少的工具。
西宝生物基因高效快速表达试剂盒包括穿刺菌菌株、抗生素和统一多克隆位点的九种表达载体。用户只要扩增克隆出一段不带终止密码子或者带终止密码子的阅读框编码基因克隆进九种表达载体,可同时筛选,节省时间。一般两至三周可以筛选出表达菌株,在此基础上,进一步根据需要进行实验室菌株的优化从而成为工程菌株。
九种表达载体包括:pLLP-OmpA、pLLP-STII、pMBP-P、pMBP-C、pET-GST、pET-Trx、pET-His、pTrc-CKS、pET-DsbA,这些表达载体经DNA 序列分析、表达试验、酶切分析、热稳定(37℃)等测试,可广泛使用于各种基因的原核表达。
两种大肠杆菌菌株:①E.coli JM109;②E.coli BL21(DE3)plysS (注意:E.coli BL21(DE3)plysS 转化菌可以添加氯霉素)。

 

更多产品说明请参考基因高效快速表达试剂盒介绍

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