内毒素去除亲和介质——层析介质优选西宝生物

来源：作者：人气：-发表时间：2016-01-13 11:25:00【大中小】

热原（Pyrogen）泛指能引起哺乳类动物发烧反应的物质，种类很多，其中主要的是内毒素（Endotoxin）。内毒素是一种脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS），是革兰氏阴性菌的细胞壁外壁层上特有的结构，细菌死亡或分解后被释放出来。生物制品中内毒素的去除一直是一项十分重要的工作。亲和层析具有高度的选择性，是去除内毒素的一种较为理想的方法。

工作原理：

去除内毒素亲和介质以自制的琼脂糖凝胶为基质，以内毒素的底物类似物为配基，产品具有很好的化学、物理稳定性和良好的生物相容性，配基稳定、可以重复使用。

去除内毒素亲和介质除了采用常规的柱层析方法去除内毒素外，还可采用静态吸附的方法进行内毒素去除。静态吸附的方法可直接将亲和介质加入到样品中，不必装柱，使用方便，去除效率高，容易放大。西宝内毒素去除亲和介质去除率可达95-99%（表1 蛋白溶液中内毒素去除结果）。

表1 蛋白溶液中内毒素去除结果

蛋白	缓冲体系	蛋白回收率（%）	内毒素去除率（%）
血红蛋白	20mM PB+0.5M NaCl，pH 8.0	87.2	99.8
人血清白蛋白	20mM PB+0.15M NaCl，pH 7.0	73.4	97.9
溶菌酶	20mM PB+0.15M NaCl，pH 7.0	97.3	99.7

产品特性：

表2 去除内毒素亲和介质的理化性质和产品特性

参数	指标
基质	4%交联琼脂糖凝胶
配基	内毒素底物类似物
形状	球形
介质平均粒径	90 μm (50~160)
配基密度	5mg/ml wet gel
吸附载量	5000-10000 Eu/ml wet gel
最高流速（25℃）	300 cm/h
推荐流速	100 cm/h
最高耐压	0.3 MPa (3 bar)
pH稳定性	3~10（长时间）；2~13（短时间）
化学稳定性	30%异丙醇、6M盐酸胍、8M尿素
物理稳定性	溶液的pH或离子强度影响介质的体积变化率<2%
保存	4~8 oC（20%乙醇）